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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
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產品介紹
產品簡介
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一種酰胺水解酶，經過和平空間站伊麗莎菌克隆，主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。翌圣酵母重組表達N-糖苷酶 F（比活性：750000 U/mL），可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點為糖蛋白內側N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉化為天冬氨酸。本產品帶his標簽，常應用于抗體及其相關蛋白去糖基化。
另外，我司還提供其他類型的糖苷酶，包括酵母重組表達的N-糖苷酶 F（Cat#20407ES，比活性：100000 U/mL），糖苷內切酶H（Cat#20414ES），糖苷內切酶S（Cat#20413ES）。
產品信息
編號 | 組分名稱 | 20415ES01 | 20415ES02 |
20415-A | PNGase F | 15 KU | 75 KU |
20415-B1 | Buffer 1（10×） | 150 μL | 750 μL |
20415-B2 | Buffer 2（10×） | 300 μL | 1500 μL |
20415-B3 | 10% NP-40 | 300 μL | 1500 μL |
產品性質
中文別名（Chinese synonym） | N-糖酰胺酶F；N-糖苷酶 F |
英文別名（English synonym） | PNGase F |
來源（Source） | 酵母重組表達 |
分子量（Molecular weight） | 36 kDa |
比活性（Specific activity） | 750000 U/mL |
緩沖液組分（Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50% Glycerol |
酶活定義（Unit Definition） | 1個酶活力單位指在10 μL的反應體系中，37℃條件下1小時從10 μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
儲存條件
-15~-25℃保存，有效期1年。
使用說明
變性條件下蛋白質去糖基化
1）在水中加入1 μL Buffer 1和目標糖蛋白（1-20 μg），至終體積10 μL；
2）100℃溫度下煮沸10 min使其變性，冰上冷卻，離心10秒；
3）加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10％NP-40、6 μL去離子水，總反應體積20 μL；
4）加入0.2~0.5 μL的PNGase，輕輕混勻。在37℃孵育1-3 h。
非變性條件下蛋白質去糖基化
1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目標糖蛋白（1-20 μg）至最終體積為 20 μL。
2）加入 0.5~1 μL 的PNGase F, 輕輕混勻。
3）37°C 孵育 4-24 h。
注意：在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加PNGase F的量和延長孵育時間。
注意事項
1. 本產品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
