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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 98007ES48 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥/生物制藥 |
產品介紹
產品簡介
白細胞介素 12(IL-12), 也稱為自然殺傷細胞刺激因子(NKSF)或細胞毒性淋巴細胞成熟因子(CLMF), 是一種異二聚體多效性細胞因子，由 40 kDa(p40)亞基和35 kDa(p35) 亞基組成。IL-12 p40亞基由IL-23共享，IL-23是另一種異二聚體細胞因子，具有與IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬細胞和B細胞產生，已被證明對T細胞和自然殺傷（NK）細胞有多種作用。雖然小鼠IL-12在人和小鼠細胞上都有活性，但人IL-12在小鼠細胞上沒有活性。
翌圣Mouse IL-12 p70 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素12 p70(Mouse IL-12 p70)。特異性抗小鼠白介素12 p70抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的小鼠白介素12 p70與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中小鼠白介素12 p70的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 98007ES48 / 98007ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 31.25-2000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 小鼠 |
檢測時長 | 4.5小時 |
靈敏度 | 7.19 pg/mL |
稀釋線性 | 96 - 124% |
回收率 | 82 - 122% |
板內差 | 3.2% |
板間差 | 4.8% |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
靈敏度檢測
IL-12 p70的低檢測限為7.19 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定10次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測30次，評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
10 | 10 | 10 | 30 | 30 | 30 | |
平均值 | 960.8 | 226.7 | 51.0 | 976.8 | 228.4 | 51.4 |
標準差 | 43.6 | 5.2 | 1.5 | 56.9 | 8.2 | 2.6 |
變異系數（%） | 4.5 | 2.3 | 2.9 | 5.8 | 3.6 | 5.0 |
回收率檢測
通過不同水平的IL-12 p70添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 104.3 | 95.2-117 |
血漿 | 91.8 | 82.3-101.6 |
細胞培養上清 | 109.6 | 98.5-122.4 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 114.5 | 109.9-122.2 |
1:04 | 104.5 | 96-112.9 |
1:08 | 112.4 | 106.9-118.8 |
1:16 | 113.8 | 103.1-121.2 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 115.2 | 114.4-116.9 |
1:04 | 113.7 | 108.9-116.8 |
1:08 | 117.9 | 111.7-124.5 |
1:16 | 118.1 | 115-121.2 |
樣本值
應用本試劑盒，檢測若干正常小鼠的血清、血漿和細胞培養上清樣本，數據僅供參考，結果見下表：
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值（pg/mL） | 樣本值（pg/mL） |
血清 | 6 | n.d. | n.d. |
血漿 | 6 | n.d. | n.d. |
細胞培養上清 | 6 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得31.25 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素12 p70。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | |
GM-CSF | IL-6 | IFN-γ |
IFN-γ | IL-10 | IL-1α |
IL-1α | IL-12 | IL-1β |
IL-1β | IL-17A | IL-4 |
IL-2 | IL-23 | IL-6 |
IL-3 | TNF-α | IL-10 |
IL-4 | IL-17A | |
IL-5 | TNF-α | |
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |
