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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1000U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10325ES80 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱
產品編號
規格
價格（元）
Recombinant DNase I (RNase-free)
10325ES80
1,000 U
495.00
10325ES90
5,000 U
2,155.00
產品描述
DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為脫氧核糖核酸酶I，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的核酸內切酶。它水解磷酸二酯鍵，產生含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。
DNase I最佳的工作pH范圍是7-8，DNase I的活性依賴于Ca2+，并可被二價金屬離子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。在Mg2+存在下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；而在Mn2+存在的條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端或有1-2個核苷酸突出的粘末端。
本酶來源于重組 E. coli 菌株，不含RNase，可以用于各種RNA樣品的處理。
產品組分
組分編號
組分名稱
產品編號/規格
10325ES80 (1,000 U)
10325ES90 (5,000 U)
10325-A
Recombinant DNase I (RNase-free) -2 U/μL
500 μL
5×500 μL
10325-B
DNase I Reaction Buffer(10×)
1 mL
5×1 mL
運輸和保存方法
干冰運輸。-20℃保存，有效期2年。推薦分裝保存，避免反復凍融。
產品應用
1.RNA提取：制備不含DNA的RNA；
2.用RNA聚合酶，如T7 RNA Polymerase（Cat#10618）進行體外轉錄后，用于去除模板DNA；
3.在進行 RT-PCR和RT-qPCR之前制備無DNA的RNA；
4.與DNA Polymerase I（Cat#12903）配合使用，用于缺口平移法標記DNA；
5.用于足跡法進行分析DNA-蛋白質相互作用；
6.生成隨機片段文庫；
7.細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。
酶活定義
37℃，10 min，*分解1 μg質粒DNA所需要的酶量。
注意事項
1. DNase I對物理變性敏感，混合時輕輕顛倒試管搖勻，請勿劇烈振蕩；
2. 酶使用時宜存放在冰盒內或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存；
3. 本產品僅做科研用途；
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
DNase Ⅰ儲存溶液
10 mM Tris-HCl（pH 7.6），2 mM CaCl2，50%甘油。
DNase Ⅰ失活或抑制
加入EDTA至終濃度為2.5 mM后，65℃加熱10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100 mM以上鹽濃度均對DNase Ⅰ有顯著抑制作用。
使用方法（應用于RNA樣品中DNA的去除實驗，僅供參考）
1. 反應體系：
請使用RNase-free離心管及槍頭配制如下反應體系：
組分名稱
體積（μL）
DNase I Reaction Buffer(10×)
1
Recombinant DNase I (RNase-free) -2 U/μL
1
RNA
X
RNase-free ddH2O
Up to 10
2. 反應條件：
37℃，15-30 min后，加入終濃度2.5 mM EDTA溶液混勻后65℃ 10 min。處理后的模板可用于后續RT-PCR或RT-qPCR等。HB220419
