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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50 T |
---|---|---|---|
貨號 | 19241ES50 | 應用領域 | 生物產業 |
產品信息
產品名稱 | 產品貨號 | 規格 | 價格(元) |
MolPure® Blood RNA Kit 血液 RNA 提取試劑盒 | 19241ES50 | 50 T | 1353.00 |
產品描述
MolPure® Blood RNA Kit 適用于血液、血漿、血清、淋巴液等樣品中 RNA 的提取。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司*新型材料,配合本公司*的裂解液配方可以可最大限度的回收高純度 RNA。提取的 RNA 純度高,質量穩定可靠,可適用于各種下游應用實驗,如 RT-PCR、RT-qPCR、體外轉錄、分子克隆等。
產品組分
類別 | 編號 | 組分名稱 | 19241ES50(50 T) |
Part I | 19241-A | 裂解液 LB (LB Buffer B3) | 50 mL |
Part II | 19241-B | RNA 吸附柱 B3 (MolPure® RNA Column B3) | 50 個 |
19241-C | 2 mL 收集管 (2 mL Collection Tube B3) | 50 個 | |
19241-D | 去蛋白液 PL (PL Buffer B3) | 25 mL | |
19241-E | 漂洗液 W* (Wash Buffer*) | 12 mL | |
19241-F | RNase-free H2O | 5 mL |
運輸和保存方法
常溫運輸。
Part I 組分 4℃避光保存,Part II 組分常溫保存。產品有效期 12 個月。
注意事項
避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
注意觀察各溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季等室溫為低溫環境時),可 37℃溫浴復溶至溶液澄清,避免影響使用效果。
裂解液LB 和去蛋白液 PL 含有刺激性物質,為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
本產品僅作科研用途!
實驗前準備
自備設備和試劑:臺式離心機、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴,氯仿、無水乙醇,RNase-free 離心管等。
除特殊指明外,所有的離心步驟均在室溫完成,使用可以達到 12,000 rpm 轉速的傳統臺式離心機。
使用前,須在漂洗液 W*(19241-E)瓶中加入 4 倍體積的無水乙醇,充分混勻后使用,并做好標記。如果發現漂洗液 W*由于運輸或保管不當造成容量嚴重不準,請用量筒定容后再加入 4 倍體積的無水乙醇。每次使用后將瓶蓋蓋緊,以保持漂洗液 W*中的乙醇含量。
操作方法
一、樣本預處理:
取 250 μL 血液(或血清、血漿、腦脊液等液體樣本)轉移至 1.5 mL 的 RNase-free 離心管中。
【注】:不足 250 μL 時,需用 PBS 或生理鹽水補足。
加入 750 μL 裂解液 LB,反復吹打,并劇烈振蕩混勻。
室溫靜置 5 min。
加入 200 μL 氯仿(自備),劇烈振蕩 15 sec 混勻。
室溫靜置 2 min。
4℃ 12,000rpm 離心 10 min,使樣品分層。取上層水相轉移至 1.5 mL 的 RNase-free 離心管中。
【注】:樣品會分為三層,下層為有機相,中間層和上層無色的水相,RNA 存在于上層水相中。
【注】:上層容量約為所加裂解液 LB 總量的 70%。如加入 750 μL 裂解液 LB,上層水相約為 525 μL。建議吸取 500 μL, 以防吸到中間層造成 DNA 污染。
加入 0.5 倍體積無水乙醇(自備),顛倒混勻。
【注】:出現沉淀屬正常現象。
二、RNA 提?。?/span>
將 RNA 吸附柱 B3 套入 2 mL 收集管中,備用。
將上述的預處理混合液加入到 RNA 吸附柱 B3 中,12,000 rpm 離心 1 min,棄掉廢液。
加入 500 μL 去蛋白液 PL,12,000 rpm 離心 30 sec,棄廢液。
將 RNA 吸附柱 B3 放回收集管,加入 500 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室溫離心 30 sec,棄廢液。
【注】:確保漂洗液 W*已添加無水乙醇。
重復一遍步驟 4。
將 RNA 吸附柱 B3 放回收集管,空柱 12,000 rpm 室溫離心 2 min,以除去殘留的漂洗液 W*。
將 RNA 吸附柱 B3 放入新的 1.5 mL RNase-free 離心管中,在 RNA 吸附柱 B3 中央加入 30-50 µL RNase-free H2O,室溫放置 2 min。然后 12,000 rpm 離心 1 min。收集濾液,即為 RNA 溶液。
【注】:可通過以下方式提高回收產量:①65℃預熱 RNase-free H2O;②將 RNA 濾液再次上柱,室溫放置 2 min 后,洗脫。
RNA 溶液可置于-80℃長期保存。
HB220112