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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 24T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 12604ES24 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module 快速DNA連接模塊 | 12604ES24 | 24 T | 3263.00 |
12604ES96 | 96 T | 10863.00 | |
12604ES98 | 960T | 87663.00 |
產品描述
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module是針對Illumina®與MGI®高通量測序平臺文庫構建專業設計的DNA連接模塊，其中最大的亮點為本產品采用一款我公司自主研發的高效連接酶Fast T4 DNA ligase。本產品可在雙鏈平末端DNA////片段或雙鏈3′-dA DNA////片段的兩端連接Illumina®與MGI®測序平臺適用的DNA接頭，具有連接效率高、簡便、可實現自動化等優勢。
本產品已與Hieff NGS® Ultima Endperp Mix（Cat#12605），2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12621）共同用于DNA文庫構建，通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。
本產品已與Hieff NGS® Ultima Endprep Mix（Cat#12605）、2×Ultima HF Amplification Mix for MGI®（Cat#13344）共同用于DNA文庫構建，通過MGI®高通量平臺測序驗證其有效性。
本產品中提供的所有試劑組分，都經過嚴格的質量與功能驗證，最高程度保障產品優異性能與批間穩定性。
產品組分
產品編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | ||
12604ES24 | 12604ES96 | 12604ES98 | ||
12604-A | Fast T4 DNA Ligase | 120 μL | 480 μL | 4.8 mL |
12604-B | 5×Fast Ligation Buffer | 480 μL | 2 × 960 μL | 2 × 9.6 mL |
運輸與保存方法
冰袋運輸。
-20℃保存，效期一年。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）本產品僅作科研用途！
使用方法
1. Adapter的質量和使用濃度直接影響連接效率及文庫產量。Adapter用量過高可能會產生較多Adapter Dimer；用量較低可能會影響連接效率及文庫產量。表1列舉了使用本試劑盒，不同Input DNA量推薦的Adapter使用量。
表1 . 500 pg-1 μg Input DNA推薦的Adapter使用濃度
Input DNA | Adapter : Input DNA摩爾比 | Input DNA | Adapter : Input DNA摩爾比 |
1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
100 ng | 100:1 | 500 pg | 400:1 |
【注】：Input DNA摩爾數（pmol）≈ Input DNA質量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度（bp）]。
2. 目前主流的合并法DNA建庫試劑盒，其末端修復和加A處理后一般不純化，直接進行接頭連接。本試劑盒可與主流的商業化末端修復加A體系兼容，進行接頭連接。反應體系請參考如下配制，渦旋瞬離后置于20℃，反應15分鐘即可。
表2 . Adapter Ligation體系
名稱 | 體積（μL） |
dA-tailed DNA | 60 |
5×Fast Ligation Buffer | 20* |
Fast T4 DNA Ligase | 5 |
DNA Adapter | X** |
ddH2O | To 100 |
【注】：*對于5×Fast Ligation Buffer，請上下顛倒、振蕩，充分混勻并瞬時后離心使用。
**根據自身需求加入適量的接頭。
【接頭添加計算舉例】：當Input DNA為100 ng，Input DNA長度為300 bp時，接頭應該添加多少？
第一步，計算Input DNA摩爾數。公式：Input DNA摩爾數（pmol）≈ Input DNA質量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度（bp）]；
Input DNA 摩爾數（pmol）=100÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，計算接頭添加摩爾數。根據注意事項三表2查詢接頭添加比例
根據表2，查得Input DNA 100ng時接頭添加比例100:1，則接頭添加摩爾數=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，計算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L（如使用其他接頭，濃度需要依據其他接頭濃度參數）；
接頭添加體積=接頭添加摩爾數（50 pmol）÷接頭濃度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）
綜上，接頭可添加3.4 μL，加1.6 μL水補齊至5 μL。（注：接頭最大加入體積不超過5 μL）
HB210810
