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DiR Iodide (DiIC18(7)) 細胞膜深紅色熒光探針
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格(元) |
DiR Iodide (DiIC18(7)) 細胞膜深紅色熒光探針 | 40757ES25 | 25mg | -20℃避光干燥保存 | 988.00 |
產品描述
DiI, DiO, DiD, DiR是一系列親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。這些環境敏感性熒光染料在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強。且具有消光系數高、極性依賴性、激發態壽命短等特點。一旦進入細胞膜后,可在整個細胞膜上擴散,*濃度時可以使整個細胞膜染色。不同的熒光染色(DiI:橙色熒光; DiO:綠色熒光; DiD:紅色熒光; DiR: 深紅色熒光)為活細胞多標、流式分析提供了便利:1)DiO和DiI可分別用標準的FITC濾光片和TRITC濾光片檢測。2)DiD是DiI的衍生物,具有明顯往紅光遷移的激發和發射光譜,這一特性使其特別適合標記具顯著自熒光效應的細胞或組織。3)DiR具強效的近紅外光穿透細胞或組織,并在近紅外區具較低的自熒光水平,這些特性使其特適用于體內成像或示蹤實驗。
產品性質
同義名(English Synonym) | 1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaine iodide |
CAS號(CAS NO.) | N/A |
分子式(Molecular Fomular) | C63H101IN2 |
分子量(Molecular Weight) | 1013.39 |
外觀(Appearance) | 藍色固體 |
Ex/Em | 748nm/780nm |
推薦濾光器(Optical Filter) | XF112-Omega, 41009-Chroma |
純度(Purity) | >97%(TLC) |
溶解性(Solubility) | 溶于DMF,DMSO,甲醇 |
結構(Structure) |
運輸與保存方法
冰袋(wet ice)運輸。產品-20 oC干燥避光保存,有效期二年。
注意事項
1) 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 染色液制備
(1)配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。
【注】未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融。
(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 μM的工作液。
【注】工作液zui終濃度建議根據不同細胞系和實驗體系來優化。建議從推薦濃度的10倍范圍內開始*濃度的摸索。
2. 懸浮細胞染色
(1)加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。
(2)37 ℃孵育細胞 2~20min,不同的細胞*培養時間不同。可以20min作為起始孵育時間,之后優化體系以得到均一的標記結果。
(3)孵育結束,按1000~1500 rpm離心5min。
(4)傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預熱的生長培養液重懸細胞。
(5)重復(3),(4)步驟兩次以上。
3. 貼壁細胞的染色
(1)將貼壁細胞培養于無菌蓋玻片上。
(2)從培養基中移走蓋玻片,吸走過量培養液,將蓋玻片放在潮濕的環境中。
(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。
(4)37 ℃孵育細胞 2~20min,不同的細胞*培養時間不同。可以20min作為起始孵育時間,之后優化體系以得到均一的標記結果。
(5)吸干染料工作液,用培養液洗蓋玻片2~3次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,孵育5~10min,然后吸干培養基。
4. 顯微鏡檢測
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。
(2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式細胞儀檢測
經DiO,DiI,DiD和DiR染色的細胞可分別用流式細胞儀的FL1,FL2,FL3或FL4通道檢測。
表1 相關產品性質
產品名稱 | 貨號 | 分子量 | Ex/Em | 推薦濾光器 | 價格(元) |
DiO | 40725ES10 | 881.7 | 484/501 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma | 488.00 |
DiI | 40726ES10 | 933.87 | 550/567 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma | 398.00 |
DiD | 40758ES25 | 959.91 | 644/663 nm | XF47-Omega, 31023-Chroma | 988.00 |
DiR | 40757ES25 | 1013.39 | 748/780 nm | XF112-Omega,41009-Chroma | 988.00 |