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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
產品介紹
Hoechst 33258
產品信息
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 外觀 | 儲存 | 價格（元） |
40729ES10 | Hoechst 33258 | 10 mg | 黃色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 180.00 |
40729ES76 | 500 mg | 黃色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 3189.00 | |
40729ES80 | 1 g | 黃色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 5310.00 |
產品描述
是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光，對細胞的毒性較低。 常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測，也可以用于普通的細胞核染色，或常規的DNA染色。
用于細胞核染色時，推薦的工作濃度為0.5-10 μg/ml。
產品性質
中文名稱（Chinese Synonym） | 二苯甲亞胺, 三氯化氫 2-(4-羥基苯基)-5-(4-甲基-1-pai嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑 |
英文名稱（English Synonym） | 2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride; bisBenzimide H 33258; HOE 33258 |
分子式（Molecular Formula） | C25H24N6O·3HCl |
分子量（Molecular Weight） | 533.88 |
CAS號（CAS NO.） | 23491-45-4 |
熒光光譜（Fluorescence Spectral） | Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460;熒光可用氙氣燈，泵弧燈或者UV激光激發；可用DAPI濾光器、藍色GFP濾光器、Alexa Fluor 350濾光器等檢測。 |
純度（Purity） | ≥95%（HPLC） |
結構（Structure） |
|
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。-20℃干燥避光保存，有效期2年。
配制母液
溶于水，溶解度可達10 mg/ml。因此可用無菌超純水配制成1-5 mg/ml的儲存液于4℃避光保存。使用時用PBS或者其他合適緩沖液將其稀釋成0.5-10 μg/ml工作液。
【注】：溶于PBS或者其他緩沖液時會有沉淀產生，因此不能用上述緩沖液進行儲存液的配制。
注意事項
1） 對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合適的緩沖液制備0.5-10 μg/ml 染色液。
2. 固定的細胞或組織染色：
a）對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的染色。
b）對于貼壁細胞或組織切片：加入適量染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c）吸除染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350 nm，發射波長460 nm。
3. 活細胞或組織染色：
a）細胞培養物中加入適量染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μl染色液。
b）在 37℃培養細胞 10～20分鐘。
c）用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350 nm，發射波長460 nm。
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