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產品描述
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質,常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等。當pUC系列的載體DNA(或其他帶有lacZ基因載體DNA)以lacZ缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時,如果在平板培養基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補性,可以根據是否呈現白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。
產品性質
中文名稱(Chinese Synonym) | 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
英文名稱(English Synonym) | Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; |
CAS號(CAS NO.) | 367-93-1 |
分子式(Molecular Formula) | C9H18O5S |
純度(Purity, HPLC) | ≥99% |
外觀(Appearance) | 白色粉末 |
分子量(Molecular Weight) | 238.30 g/mol |
結構式(Structure) |
運輸與保存方法
冰袋運輸。粉末-20℃避光保存,有效期2年。
注意事項
1)含有IPTG的培養基4℃避光保存,須在1周內使用。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3)本產品僅作科研用途!
儲存液配制
1)稱取0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解IPTG粉末,配制0.1 M的儲存液;
2)用5-10 mL去離子水潤濕0.22 μm針孔過濾;
3)0.22 μm濾膜除菌上述IPTG溶液。分裝成1 mL,-20℃凍存,有效期可達1年。
藍白斑篩選
1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養基溶液
1)高壓滅菌已加瓊脂的培養基,并冷卻到50℃左右。
2)每毫升培養基內加入10 μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其終濃度達到1 mM);
3)加入適量抗生素;
4)混勻后按照平板大小倒入適量培養基,待培養基冷卻至室溫后,接種細菌于37℃過夜培養。
2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面
1)于無菌超凈工作臺制備平板(如LB 瓊脂板);
2)取40 μL 0.1 M IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均勻地涂布于準備好的平板上;
【注】:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產生假陽性,因此,為了得到更好結果,建議后續操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。
3)37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min或更長)。接種細菌于37℃過夜培養直到菌落形成。
HB220811