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鼠源RNase抑制劑

2017-6-1  閱讀(522)

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Murine RNase Inhibitor  鼠源RNase抑制劑

-------RNase無所遁形,使RNA完好無缺

RNase無處不在

    在樣品材料準(zhǔn)備時(shí),或RNA純化時(shí),亦或?qū)嶒?yàn)的反應(yīng)體系配制的過程中,均有可能引入RNase的污染。RNase可謂是*,無處不在。RNase的來源主要包括實(shí)驗(yàn)人員的皮膚或唾沫等、槍頭等在內(nèi)的實(shí)驗(yàn)耗材及配制反應(yīng)體系的各組分等。

關(guān)于RNase

RNaseRibonuclease,核糖核酸酶)是一類能夠催化RNA降解為小分子RNA的核酸酶,分為核糖核酸內(nèi)切酶和     核糖核酸外切酶。前者主要包括RNase A、RNase H等,后者主要包括RNase R等。

RNase——特別是RNase A家族的成員——是一些微小緊湊的蛋白,它們含有一些半胱氨酸殘基能夠形成許多分子內(nèi)二硫鍵。因此在冷卻至室溫后,在無變性劑存在的條件下,變性的RNase會(huì)重新恢復(fù)其天然結(jié)構(gòu)及部分功能。因此,RNase在反復(fù)凍融,甚至高壓滅菌后仍會(huì)保留相當(dāng)?shù)幕钚浴?/span>

    RNase可降解RNA,即使痕量的RNase也會(huì)降低RNA的完整度。RNase是一類極度穩(wěn)定、不易失活的RNA“天敵。

關(guān)于RNase Inhibitor

    在細(xì)胞內(nèi),為避免RNase對(duì)RNA的降解,RNA通常會(huì)被5’加帽、3’A”或者形成RNA-蛋白復(fù)合體。而在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),避免RNase污染的zui主要手段就是使用RNase Inhibitor。

RNase Inhibitor是人的胎盤中存在的一種特異性RNase抑制劑,能夠特異地RNase以非共價(jià)鍵結(jié)合形成復(fù)合體從而使RNase失活。

Murine RNase Inhibitor

    與人源RNase inhibitor相比,Murine RNase Inhibitor不含人源蛋白中的兩個(gè)對(duì)氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性,且更加適合于對(duì)高DTT敏感性的實(shí)驗(yàn)(qPCR)。翊圣生物在成熟的蛋白表達(dá)和純化平臺(tái)基礎(chǔ)上,借助大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng),并通過離子交換和親和層析而純化獲得純度達(dá)95%的重組鼠源RNase抑制劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)

 廣譜的RNase抑制活性:可抑制包括RNase ARNase BRNase C等在內(nèi)的RNase。

兼容廣泛的反應(yīng)條件:在pH 5.09.0條件下和2555的溫度下都具有活性(60時(shí)仍保留部分活性)。

熱穩(wěn)定性的RNase抑制劑:適用于熱穩(wěn)定型逆轉(zhuǎn)錄酶(55-60)。

兼容廣泛的下游實(shí)驗(yàn):對(duì)SP6、T7T3 RNA聚合酶,AMV、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq DNA聚合酶酶活性無影響。

批間穩(wěn)定性:成熟的蛋白表達(dá)和純化平臺(tái),可大規(guī)模生產(chǎn),保證批次間產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

質(zhì)量控制

    核酸外切酶殘留檢測(cè):200U本品和0.6μg λ-Hind III74下反應(yīng)1小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。

    核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè):200U本品和0.6μg Supercoiled pBR322 DNA74下反應(yīng)1小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。

     大腸桿菌殘留DNA殘留檢測(cè):50μL體系中,加入200U本品,以ddH2O為模板,擴(kuò)增E.coli 16s rDNA基因。35個(gè)循環(huán)后進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,無擴(kuò)增條帶。

     純度測(cè)試:經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè),純度達(dá)95%以上。

產(chǎn)品應(yīng)用

1. RT-PCR 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。

2. qRT-PCR 實(shí)時(shí)熒光定量PCR保護(hù)RNA。

3. in vitro transcription/translation 體外轉(zhuǎn)錄和翻譯系統(tǒng)中保護(hù)RNA

4. 用于RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn)。

5. 輔助制備無Rnase 的抗體等。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

 

1. RNase inhibitor抑制RNase A活性,保護(hù)RNA完整性。

1μL RNA inhibitor可有效抑制5ng RNase1μg HEK細(xì)胞總RNA電泳結(jié)果。

FAQ

1. Murine RNase inhibitor是否會(huì)影響RT-PCRqRT-PCR實(shí)驗(yàn)?

答:不會(huì)影響。經(jīng)質(zhì)量測(cè)試,每批次Murine RNase inbitior均不含有基因組污染,可適用于RT-PCRqRT-PCR實(shí)驗(yàn)。

2. 在使用Murine RNase inhibitor配制反應(yīng)體系時(shí),有什么注意事項(xiàng)?

答:配制體系時(shí),在其他可能引入RNase污染來源的組分加入前,RNase inhibitor可首先加入。

訂購信息

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格(元)

10603ES05

Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑

2KU

216.00

10603ES10

Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑

10KU

916.00

10603ES20

Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑

20KU

1695.00

10603ES60

Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑

100KU

11865.00

HB170531

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