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            翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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            單/多點突變試劑盒

            2014-10-2  閱讀(1194)

            分享:

            Hieff MutTM 系列試劑盒是基于Hieff CloneTM快速克隆技術的定點突變系統,目標質粒擴增產物經DpnI消化、Hieff CloneTM重組環化后直接進行轉化即可完成定點突變。本試劑盒由兩個模塊組成:

            HieffTM Pfu DNA Polymerase擴增模塊:提供zui高保真度的擴增,可擴增20 kb以內的質粒;擴增以指數方式進行,極大減少了模板使用量,有利于原始甲基化模板的*降解。

            Hieff CloneTM快速克隆模塊:可環化PCR產物。 

            Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit單點突變試劑盒適用于長度小于20 kb的任何質粒擴增,可針對單堿基、連續多堿基、不連續雙堿基(相距超過50 bp)定點突變。

            Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Ki多點突變試劑盒t可一次性向目標質粒上35個不連續位點(相距超過50bp)同時引入定點突變。

            使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit進行單堿基(或連續多堿基)定點突變

            使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit進行不連續雙堿基定點突變實驗方案 (兩突變位點相距超過50 bp)

            使用Hieff MutTM Muti Site-Directed Mutagenesis Kit進行不連續雙堿基定點突變實驗方案 (兩突變位點相距超過50 bp)

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            *(元)

            Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit
            單點突變試劑盒

            11003ES10

            10 rxn

            1

            720

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            Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit
            多點突變試劑盒

            11004ES10

            10 rxn

            n≤5

            1228

            FAQ

            Q1. 請問單點突變/多點突變是否都是每個位點設計一對引物?是否都包括堿基/氨基酸突變,堿基插入和缺失?堿基插入/缺失的zui大長度是多少?是否可以進行連續氨基酸的突變,氨基酸的數量限制是多少?

            A1:單點突變/多點突變是每個位點設計一對引物;正反向引物可以包括堿基/氨基酸突變,堿基插入和缺失,也可以將這些堿基/氨基酸突變/堿基插入和缺失放在一條引物上;堿基插入/缺失的zui大長度沒有限制,可為任何長度;可以進行連續氨基酸的突變,無特別數量限制。

            Q2. 引物設計的原則是什么?有無的引物設計軟件,若沒有,推薦幾個好用的引物設計軟件。

            A2:引物設計基本原則是使擴增產物末端有同源序列即可。無官設計軟件,推薦軟件Primer5Vector NTI

            Q3. 本試劑盒可以進行多點突變,能夠同時進行幾個位點的突變? 突變效率如何?進行單點突變的突變效率是多少?

            A3:zui高同時突變6個獨立位點(每個位點之間相距超過100bp)。突變效率非常高(單次反應500多個克隆,陽性率超過95%

            Q4. kit不含有感受態細胞,推薦的感受態細胞是哪些?
            A4*0DHXL10。常規克隆菌都可以。

            Q5. 該試劑盒總共的工作時間一般多久? 

            A5:實驗操作時間3小時左右。

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