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通用型線粒體DNA損傷超長延展定量PCR擴增分析試劑盒
閱讀：1253 發布時間：2016-7-12主要用途
我公司通用型線粒體DNA損傷超長延展定量PCR擴增分析試劑是一種旨在運用rTth聚合酶XL進行超長延展PCR擴增，產生8.9kb線粒體DNA目標片段，根據產物量值的差異，來定量分析線粒體DNA損傷程度的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應用于腫瘤、衰老、毒理作用、DNA修復等研究。產品即到即用，性能穩定，無核酶污染，操作便捷，敏感，重復性強。
注意事項
- 本產品為20次操作
- 操作時，須戴手套
- 建議使用帶濾芯的槍頭，避免污染
- 在－20℃冰箱里儲存的產品避免反復凍融
- 建議樣品為純化的線粒體DNA
- 根據用戶PCR儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）
- 本產品適合各種熒光定量PCR儀
- 建議整個操作在4℃下進行
- 配制完成后，即刻進行擴增反應，以確保反應物的活性
- PCR擴增反應的初3個循環為定量基線；3至15個循環的熒光信號的10倍值為熒光閾值；熒光信號達到閾值所需的循環數為Ct值（參考圖像如下)
- Ct值作為端粒酶活性的計量單位
- 用戶可以使用293細胞（10，100，和1000細胞數）作為陽性對照，以此建立標準曲線：橫座標（X軸）為細胞量對數，縱座標（Y軸）為Ct值
- 建議選用正常淋巴細胞作為正常對照或校正對照，以此作為評價hTERT的參考指標；用戶可以選用任何其它正常細胞或組織，例如腫瘤組織旁的正常組織等
- 建議選用hTERT陽性表達的MCF7細胞作為陽性對照，以此構建標準曲線：縱坐標（Y軸）為Ct值，橫坐標（X軸）為已知細胞量對數值或拷貝數或RNA量等，其低有效用量作為樣品檢測量的標準
- 建議使用無模板作為陰性對照
- 內參液（Reagent E）為看家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase；GAPDH）作為比較分析時樣品測試用量校正統一的參考標準
- Ct值可以作為hTERT表達的計量單位，也可以根據標準曲線轉換為表達分子數進行計量
- 本公司提供系列線粒體DNA損傷檢測試劑產品
如:
通用型線粒體DNA損傷AP位點比色法定量分析試劑盒