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上海哈靈生物科技有限公司>技術文章>植物細胞壁鈣熒光白熒光染色試劑盒產品說明書

技術文章

植物細胞壁鈣熒光白熒光染色試劑盒產品說明書

閱讀:1175          發布時間:2024-11-1

主要用途

植物細胞壁鈣熒光白熒光染色試劑是一種經典的技術方法,旨在通過熒光染色劑鈣熒光白與細胞壁中的纖維素和殼多糖結合,產生熒光,從而檢測植物細胞壁的生成變化。該技術經過精心研制和成功實驗證明,可用于顯示植物細胞壁的生成變化和原生質體細胞的鑒定。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡易,支持活體檢測,性能穩定。

技術背景

鈣熒光白(Calcofluor white;CFW)是一種非特異性熒光增亮染料,能夠結合β-鏈接的糖苷,如纖維素(cellulose)和殼多糖(chitin)等。在植物生物學中,鈣熒光白用于顯示藻類和高等植物中細胞壁生物合成過程中的細胞壁生成變化,以及原生質體細胞的鑒定。

產品內容

  • 清理液(Reagent A):XX毫升

  • 染色液(Reagent B):XX微升

  • 產品說明書:1份

保存方式

  • 保存染色液(Reagent B)在-20℃冰箱里,嚴格避免光照。

  • 其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6個月。

用戶自備

  • 1.5毫升離心管:用于細胞染色的容器

  • 微型臺式離心機:用于沉淀細胞

  • (共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察熒光細胞

實驗步驟

  1. 準備1管待測植物細胞或原生質體細胞(1 × 10^7細胞/毫升)。

  2. 移取100微升懸浮細胞到1.5毫升離心管。

  3. 加入XX微升染色液(Reagent B),混勻。

  4. 室溫下孵育5分鐘,避免光照。

  5. 放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為1000g。

  6. 小心抽去上清液。

  7. 加入XX微升清理液(Reagent A),輕柔混勻細胞顆粒群。

  8. 放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為1000g。

  9. 小心抽去上清液。

  10. 重復實驗步驟7至9二次。

  11. 加入XX微升清理液(Reagent A),輕柔混勻細胞顆粒群。

  12. 移取10微升上述細胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片。

  13. 使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察:激發波長355nm,散發波長440nm——細胞壁顯示強烈藍色熒光。

注意事項

  1. 本產品為20次操作。

  2. 操作時,須戴手套。

  3. 操作時,須無菌操作,避免污染母液。

  4. 孵育時,必須避免光照。

  5. 建議細胞染色完成后,即刻進行細胞熒光分析。

  6. 本公司提供系列植物細胞分析試劑產品。

質量標準

  1. 本產品經鑒定性能穩定。

  2. 本產品經鑒定熒光清晰。


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