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技術文章

10% EDTA 脫鈣液說明書

閱讀:5847          發布時間:2021-1-21

產品簡介: EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結構影響小,可以較好的保存組織的某 些酶類,經 EDTA 脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢, 一般脫需要數周至數月

保存條件: 2~8°C 保存。 
操作流程: 1、骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約 5mm;
2、組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min;
3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min; 
4、組織轉移至 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長時間。如果想加快 脫鈣速度,可以置于 37°C 進行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續脫鈣,多數組 織脫鈣 2 周~3 個月即可,每周更換一次,直至終點; 
5、用蒸餾水沖洗數次; 
6、常規脫水、包埋。

注意事項: 1、 厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。
 2、 適當加溫能加快脫鈣的速度,一般不應超過 37~40°C,溫度過高容易使骨組織造成松 散解體,尤其不可大于 60°C。
 3、脫鈣應*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時盡量縮短 脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。 
4、 脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5、 骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,不應先脫鈣后固定,以便減少組織的 損傷程度。
 6、 每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影 響染色結果。

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