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TGF-β1,進口雞轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒原理

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更新時間:2017-09-19 11:21:54瀏覽次數(shù):718

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 兩周    
TGF-β1,進口雞轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)的含量。

詳細介紹

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中雞轉(zhuǎn)化生長因子β1TGF-β1)的含量。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

TGF-β1,進口雞轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒原理主要優(yōu)點

 1.高效、靈敏、特異的抗體;

 2. 穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;

 3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

 4. 適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;

 5. zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

 

TGF-β1,進口雞轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒原理樣本要求:

1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

TGF-β1,進口雞轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒原理操作步驟

1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

注意事項

1.操作嚴(yán)格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。

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