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PPV 細小病毒抗體檢測試劑盒
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PPV 細小病毒抗體檢測試劑盒
(以試劑盒內的英文說明書為準)
一、簡介
細小病毒(PPV)是單鏈DNA病毒,屬于細小病毒科,該病毒在豬群中廣泛感染,導致豬的再生障礙,也是給*種豬造成巨大經濟損失的疫病之一。病毒可通過胎盤垂直傳播,可導致胎兒死亡、木乃伊胎、死產、流產等。但是,PPV是否感染依賴于妊娠階段母豬的免疫學狀態。在無免疫力時,妊娠的前35天感染PPV可導致胎兒死亡;大約70天之后胎兒有免疫能力時,可以對PPV產生免疫應答從而避免感染,常見于PPV抗體陽性小豬。
疫病確診依靠PPV的分離,血清學方法也可用于診斷。本試劑盒基于雙抗夾心ELISA原理診斷血清中的抗PPV抗體。
二、參考文獻
1. F. Westenbrink, M.A. Veldhuis and J.M.A. Brinkhof. An enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies to porcine parvovirus. Journal of Virological Methods, 23 (1989): 169-178.
2. 酶聯免疫吸附試驗檢測豬細小病毒抗體的研究,病毒學方法雜志,23(1998):169-178
三、應用
本試劑盒用于檢測血清標本中的抗PPV抗體,可用于豬感染PPV的診斷。感染7天后即可檢測到特異性抗體,感染10天后抗體滴度可達到穩定水平,檢測效果更佳。
采用檢測感染不同時期雙份血清標本的方法,可以更為準確的判斷PPV的感染情況。母豬的流產、死胎和不孕說明其可能感染了PPV。
四、 原理
先把稀釋的血清和PPV抗原混合,孵育,如果血清中有抗體會同抗原發生反應;之后混合液被加入到抗體包被的檢測板上,孵育,體系中游離的PPV抗原結合到板孔上,但之前加入的抗原已經同血清中的抗體形成了免疫混合物,不能結合到板孔上;通過洗板,未結合的物質都被洗掉,隨后加入的試劑結合到抗原上;孵育后再洗板,加入底物TMB,在過氧化物存在時發生顯色反應,表明血清中沒有抗PPV抗體,當沒有顯色反應時證明血清中有抗PPV抗體。
本試劑盒是單稀釋試驗。血清樣品在1:5稀釋后檢測,包括兩個對照血清,對照血清1為陽性對照,抑制率≥50%,血清2為陰性對照,抑制率<50%。
五、試劑盒成分
1. 2塊酶標板,2 test strip plates in a re-sealable aluminium foil bag
2. 2瓶凍干抗原,2 vials lyophilized antigen
3. 1瓶濃縮酶標結合物,1 vial conjugate (concentrated)
4. 1瓶陽性對照血清,1 vial reference serum 1 (positive control)
5. 1瓶陰性對照血清,1 vial reference serum 2 (negative control)
6. 1瓶凍干馬血清,1 vial lyophilized horse serum
7. 1瓶濃縮稀釋緩沖液, 1 vial dilution buffer (concentrated)
8. 1瓶底物液(直接使用),1 vial chromogen / substrate solution (ready-to-use)
9. 1瓶終止液(直接使用),1 vial stop solution (ready-to-use)
10. 1瓶濃縮洗液,1 vial washing fluid (concentrated)
11. 1瓶去離子水, 1 vial demineralized water
12. 1個孵育使用的蓋子,1 lid to cover the strips during incubation