1.穩定性驗證的重要性
ELISA試劑盒的穩定性直接影響檢測結果的準確性和重復性。穩定性驗證包括短期穩定性（開瓶穩定性）和長期穩定性（有效期驗證），確保試劑在運輸、儲存和使用過程中性能不受影響。
驗證方法
加速穩定性試驗：將試劑盒置于高溫（如37°C）或反復凍融條件下，模擬環境，評估性能變化。
實時穩定性監測：定期檢測標準品、酶標抗體等關鍵組分的活性，記錄信號值（OD值）和標準曲線斜率的變化。
開瓶穩定性測試：驗證試劑開封后在不同保存條件下的有效期（如4°C保存1周是否可用）。
2.關鍵試劑的保存條件優化
不同組分對溫度、光照和濕度敏感，需分類保存：
(1)標準品與抗體
長期保存：-20°C或-80°C（避免反復凍融，建議分裝）。
短期使用：4°C保存（通常1~2周），避免劇烈震蕩。
(2)酶標物（HRP/ALP標記抗體）
需避光保存（棕色管或鋁箔包裹），4°C短期存放，長期置于-20°C。
反復凍融易導致酶失活，建議小劑量分裝。
(3)顯色底物（TMB/OPD）
TMB對光敏感，需嚴格避光，4°C保存；OPD需冷凍存放（-20°C）。
開封后若變色（如TMB變藍），表明氧化失效，需更換。
(4)洗滌液與終止液
洗滌液（含吐溫20）可室溫保存，但避免污染；
終止液（強酸/強堿）需密封防揮發，長期存放建議4°C。
3.常見問題與解決方案
信號衰減：可能因酶標物活性下降，需檢查保存溫度及凍融次數。
高背景噪聲：洗滌液污染或封閉劑失效，建議更換新鮮試劑。
標準曲線異常：標準品降解，需重新標定或更換批次。
4.最佳實踐建議
嚴格記錄：標注試劑開封日期、保存條件及使用次數。
分裝保存：減少反復凍融，尤其是酶和抗體。
定期校準：每次實驗前驗證標準曲線和陰陽性對照。
通過科學的穩定性驗證和保存優化，可顯著延長試劑盒壽命，確保檢測結果可靠。
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