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哺乳類實驗動物病理剖檢方法
點擊次數：985 發布時間：2017-11-6
一、基本要求
（一）實驗動物背景資料記錄
（1）實驗動物來源、種類、年齡、性別、原編號、體重、臨床癥狀等。
（2）剖檢時間、地點，麻醉方法、時間、麻醉者，處死方法、解剖者、記錄人、溫度、濕度。
（3）其他指標：動物剖殺前禁食（不禁水）時間一致，為12h。
（二）體表檢查
一般用于組織學取材的實驗動物剖殺前應先隔離檢疫7～10d，用于實驗組和對照組動物的病理剖檢視不同動物實驗的要求而定。剖檢前的體表檢查項目如下：
1、發育狀態
體格發育是否與年齡、品種相稱，各部發育比例是否正常，有無畸形。
2、營養狀態
豐滿還是消瘦，檢查時可用手撫摸實驗動物背、腰部，營養良好時，背腰部厚實，皮膚彈性好。營養不良時，背腰部椎骨突出，肋骨明顯。
3、精神狀態
實驗動物的自主活動、運動情況，對外界的反應（遲鈍或亢進）、步態如何。
4、感覺器官
眼睛的瞳孔是否清晰等，有無分泌物，眼瞼有無發炎及紅腫，球結膜顏色變化，有否潮紅、蒼白、黃染或發紺。
5、呼吸系統
呼吸動物如呼吸次數、節律、有無呼吸困難；上呼吸道檢查如鼻腔分泌物多少、有無噴嚏和咳嗽；必要時可通過聽診檢查肺部。
6、消化系統
采食與飲水觀察，包括食欲廢絕、減退、亢進和異嗜，口腔黏膜顏色和氣味。有無嘔吐、腹瀉、便秘，肛周有無污物，糞便數量、硬度、顏色、氣味等。
7、被毛和皮膚
檢查皮膚顏色、溫度、彈性、有無創傷、膿瘍、疥癬、濕疹，毛發色澤、疏密、有無脫落。
（三）病理取材基本要求
（1） 病理檢查應分層次進行，先進行一般外觀觀察，然后剖檢觀察，再進行光鏡詳細檢查。
（2） 通常選擇正常與病變交界處組織，即包括病變本身及病變周圍組織。
（3） 對照組動物相同器官取材時，選材部位應盡量一致。
（4） 肉眼看不到的明顯病變時，各試驗組選取標本位置應一致。
（5） 所選組織應包括臟器全部層次結構或重要結構，如腎應包括皮質、髓質和腎盂。
（6） 體積大和分葉的器官，應視不同組織選取多個部位，小器官可整體取材并固定，如淋巴結、扁桃體、甲狀腺等。
（7） 胃腸標本應將內容物沖洗掉，以免內容物影響組織固定，產生自溶。
（8） 所取材料應盡量保持肉眼標本的完整性，不宜過厚或過薄，一般厚約3～5mm，大小為1.5～2cm2。
（9） 切取組織時不要擠壓，使用鋒利刀具，少用剪刀，勿選用被器械鉗壓過的部位。
（10）標本取材要熟悉，盡可能快的完成整個過程，特別是易自溶的組織，如腸道、腦、腺體等。
（11）剖檢記錄應客觀、詳細，用形象描述而不能用診斷的病名來代替。
（12）同一實驗中的對照組和實驗組動物應交叉剖檢，嚴格統一各種條件和操作，盡量避免各種可能的干擾因素。
二、病理剖檢基本操作
（一）常用器械及使用方法
1、解剖刀
主要用于切開和分割軟組織，刀片宜用血管鉗（可持針鉗）夾持安裝，避免割傷手指。
常用的持刀法有以下4種：執弓式、抓持式、執筆式、反挑式。
2、手術剪
用于分離與剪開
3、血管鉗
用于分離和鉗夾組織，鉗夾縫合針和布巾等。
4、手術鑷
用于夾持組織，以利于解剖和縫合。
5、拉鉤
用于牽引和暴露
（二）基本操作
1、切開
在同一平面上時，先繃緊組織，將刀刃與平面垂直，用力要得當，一次垂直切開，切口整齊而不偏斜，禁止斜切和鋸切，以減少損傷。切開多層組織時，一般應按組織層次分層切開，避免損傷深層組織器官。
2、組織分離法
可用銳性分離法，使用刀、剪等銳性器械直接切割，如皮膚、黏膜、精細結構和緊密連結組織的分離；也可用鈍性分離法，使用分柄、止血鉗、剝離器，手指等分離，如肌肉，疏松結締組織等的分離。
3、結扎
用絲線打結的方法扎組織和血管，參與縫合器官和皮膚。
4、止血
大量出血導致胸、腹部積血使剖檢視野模糊不清，可能會影響和干擾病變的辨別和取材，因此動物剖檢有時要求止血。
（1） 紗布塊壓迫止血法。剖檢過程中，為觀察病變性質和部位，辨清組織和神、血管通路，以及對較廣泛的毛細血管滲出，可用紗布按壓施行短暫性的止血，但不可用紗布來回擦拭血液，以免損傷組織。
（2） 鉗夾止血法。先用紗布塊止血，看清出血點或血管后用止血鉗的垂直對準出血點，迅速而準確的鉗夾并捻轉，使血管閉塞而止血。
（3） 結扎止血法。用于動脈出血或較大的血管出血。
三、剖檢取材程序
（一）實驗動物尸體的固定，通常為仰臥位固定。
（二）剖檢順序多為先腹腔后胸腔，再腦、脊髓、骨髓、皮膚肌肉等。取材順序基本與此相同。
（三） 檢查內容
1、位置
有無移位、異位
2、大小
體積增大、縮小或腫大
3、色澤
整體或局部顏色的增減改變。
4、附加物
有無出血、積液、粘連。
5、質地
硬、韌、軟等。
6、切面
多汁、泡沫狀、帶血、膿汁、干燥等。
7 、中空器官的黏膜面
有無出血、潰瘍、增厚、隆起物等。
（四）剖檢和取材程度
1、腹腔和腹腔器官
沿腹部正中線切開劍突至肛門之間的腹前壁，再沿zui低位肋骨分別向左右兩側切開側腹壁至脊柱兩旁，*暴露腹腔器官。觀察有無積液、血液和炎性滲出物，如有則用吸管吸出，測量容積并經離心沉淀涂片檢查，必要時作細菌培養。檢查粘膜是否光滑，有無充血、瘀血、出血、破裂、膿腫、粘連、腫瘤、寄生蟲等，膈的緊張度及有無破裂。
（1）脾臟。檢查大小、厚薄、硬度、性狀、色澤、有否肥厚、破裂等。然后沿長軸將脾切成兩半，切面要平整，檢查脾小梁、紅髓、濾泡的色澤，切面的出血量。
（2） 胰腺。檢查胰腺色澤和硬度，切面檢查有無出血。
（3）胃腸。檢查胃的大小、胃腸道漿膜面的色澤，有無粘連、腫瘤、寄生蟲結節。然后沿胃大彎、腸系膜附著部依次剪開胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結腸、直腸。觀察胃內有無異物，內容物的氣味及性狀，除去內容物，檢查黏膜顏色，有無充血、出血、化膿。采用邊剪開邊觀察的辦法檢查腸管，觀察腸內容物數量、性狀，有無氣體、血液、異物、寄生蟲，腸黏膜皺壁有無增厚、水腫、充血、粘液量、潰瘍、壞死、淋巴組織性狀及有無炎癥。
（4） 腎臟。首先檢查腎臟大小、硬度、被膜是否容易剝離，腎表面的色澤、平滑度，有無疤痕、出血變化。然后檢查切面皮質和髓質的色澤，有無瘀血、出血、化膿和梗死。注意觀察皮質和髓質交界處的切面是否隆突，以及腎盂、輸尿管、腎淋巴結的性狀，有無腫瘤及寄生蟲等。
（5） 肝臟。首先檢查肝臟的大小、被膜的性狀、邊緣的厚薄、實質的硬度和色澤，以及肝淋巴結、血管、肝管等的性狀。然后作切面，檢查切面的出血量、色澤，肝小葉性狀、有無膿腫、肝壞死等變化。
（6） 腎上腺。觀察外形、大小、色澤和硬度，作縱切和橫切，檢查皮質和髓質的色澤及有無出血。
2、盆腔器官
（1） 膀胱。檢查膀胱的大小、尿量及色澤，黏膜有無出血、炎癥和結石等。
（2） 雄性生殖器官。檢查睪丸、附睪、凝固腺、前列腺有無粘連、出血、水腫、積液等。
（3） 雌性生殖器官。沿子宮體背側剪開子宮角，檢查子宮內膜的色澤、有無充血、出血、炎癥等，觀察卵巢和輸卵管有無粘連、出血、水腫、積液等。
3、胸腔、口腔及其器官
用鑷子夾住胸骨劍突，剪斷膈肌與胸骨的連結，提起胸骨，在胸椎兩側分別剪斷左、右側胸壁的肋骨，取下整個胸壁，打開胸腔，依次取出胸腺和心臟。將下頜骨的兩下頜支內側與舌連結的肌肉切斷，將咽、喉、氣管、食道與周圍組織分離，用鑷子夾住氣管向上提起，剪斷肺與胸膜的連結韌帶，然后將咽、喉、氣管、食道連同整個肺臟一并取出。如有積液應觀察其數量和性狀，盡量吸取，測量容積并涂片，檢查胸膜色澤，有無出血、充血或粘連。
（1） 心臟。剪開心包膜，暴露心臟，注意心包的光澤度及心包內液體的情況，心臟的大小、外形、心外膜情況。自下腔靜脈入口處至右心房作直線剖開，從此直線中點沿心臟右緣剖至心尖部，從距離心尖部與心室間隔右側1cm處平行地剖至肺動脈；檢查右心房、右心室、三尖瓣、肺動脈瓣、腱索有否病變。自左右靜脈入口處將左心房直線切開，沿心臟左緣剖至心尖部，再從距離心尖部與心室間隔左側1cm處平行地剖開左心室的前壁和主動脈，檢查二尖瓣、主動脈瓣、腱索有無病變，左心房、左心室內壁有無出血和感染。自冠狀動脈口起剪開前降支和旋支，在主動脈根部右側，于右心室的心外膜找到右冠狀動脈主干，先橫切一刀，再剪至后降支；觀察有無粥樣硬化和血栓等。
（2） 口腔。檢查牙齒的變化，口腔黏膜的色澤、有無外傷、潰瘍和白斑，舌黏膜有無出血、外傷及舌苔的情況。
（3） 咽喉。觀察喉頭、會厭軟骨黏膜的色澤、淋巴結的性狀及喉囊有無積膿。
（4） 鼻腔。檢查鼻腔和鼻中隔黏膜的色澤、有無出血、炎性水腫、結節、糜爛、潰瘍穿孔及疤痕等。
（5） 下頜及頸部淋巴結。檢查下頜及頸部淋巴結的大小、硬度、有無出血和化膿等。
（6） 氣管。檢查氣管有無出血、黏液量等。
（7） 肺臟。檢查肺的色澤、有無出血、炎癥、肺氣腫、肺萎縮、腫瘤等。
（8） 其他器官。胸腺，甲狀腺，扁桃體等的色澤、有無粘連、出血、水腫等。
4、顱腔及腦
以猴為例，剝離顱頂部軟組織，沿眉弓至枕外隆凸上0.5cm處的連線，用弓形鋸環繞該線鋸開顱骨外板及板障，然后用丁字鑿輕輕鑿開內板，揭開顱蓋，此時可見覆蓋于腦表面的硬腦膜，切開硬腦膜暴露腦組織，在距顱骨鋸口斷端上0.5cm處，從前向后環行剪開硬腦膜，枕部的硬腦膜應保留1.5cm長，防止取腦過程向后推壓腦組織時，枕骨斷端損壞枕葉腦組織。向后方輕輕揭起硬腦膜及大腦鐮，暴露腦組織，用手指從額骨前上方伸入顱前窩，輕輕推壓大腦額葉，直至見到篩板上的嗅球為止，切斷嗅絲與嗅球的，將嗅球與腦一齊拉起，見到視神經和視交叉時立刻停止，在腦底附近依次切斷頸內動脈、視神經，再將腦向后拉，可見到垂體及漏斗，繼續將腦向后拉起，切斷連于腦的腦神經。從腦干腹側面把手術刀伸入枕骨大孔，切斷脊髓，即可將腦取出，用流水沖洗干凈備用。新鮮腦很軟，易變形和受挫傷，操作過程中必須用手扶托，取出腦后應立刻用紗布包裹，浸泡固定液中保存，以免變形。
檢查軟腦膜、硬腦膜血管充盈情況，腦回之間的腦溝中液體的數量與色澤，腦表面凸起或凹下的地方是否明顯，可用手觸膜判定其硬度。用刀將腦做一水平切面，保留胼胝體，暴露側腦室，注意檢查尾狀核有無出血、軟化灶。側腦室內容物數量、性質，然后將腦做多處切面，檢查有無變化。
四、臟器測量和稱重
（1） 解剖后應迅速將臟器稱重，以免水分蒸發造成差異，特別是腎上腺等小器官的稱重。
（2） 臟器稱重前應盡量將周圍脂肪組織和結締組織剔除，并用濾紙吸去臟器表面血液及體液，特別是腎上腺、甲狀腺、前列腺等較小的器官，更要新鮮稱重，防止器官干燥失水而重量減輕。
（3） 空腔器官稱重前，應清除其腔內液體，如心臟應除去。