植物組織培養的目的原理和步驟!以及需要注意的地方有哪些
植物組織培養的目的原理和步驟!以及需要注意的地方有哪些
(一)目的
植物組織培養為一基本生物技術。植物之無土繁殖、無病毒植株生產、植物生理、形態、遺傳等研究,均可利用比技術為工具。而且具不受限于季節、度地、在小空間即可完成等優點。本實驗及利用時地操作,令學生學習相關的知識與技巧。
(二)原理
利用細胞分化之性,以任何單胞擁有與母本相同的遺傳組成,來發育成與母本相同性狀的潛能。同理也可解釋植物的再生現象,不同植物種類具有不同再生能力,例如:非洲董葉插,可于切口處再生新的植株。而器官發生則是植物于再生的途徑中導向根或芽等器官之形成。
(三)材料
蝴蝶蘭或其他植物
(四)設備
無菌操作臺、植物組織切剪器材及捏子、70%酒精、培養皿、恒溫箱
(五)藥品
MS培養基
(六)步驟
1. 首先切取根尖或莖頂等生長點(這會比較好操作)。
2. 將取用部位以自來水沖洗,并將雜質蜘蛛網等等,去除乾淨。
3. 將其放入1%次氯酸鈉含1-2滴展著劑(三角瓶或血清瓶裝置),放置超音波震1-2分,而后手搖10分鐘。
4. 將使用之瓶灌使用70%酒精噴覆其外部,放入無菌操作臺內。
5. 將瓶口先用火烤過,打開將1%次氯酸鈉倒除。
6. 用無菌水清洗2-3次,甚至直至乾淨為止。
7. 用捏子將果夾取出,放置以消毒過培養皿。
8. 利用刀子將切取部位切出約0.5公分之大小,置于無菌培養基上。
9. 封好瓶蓋,在放置培養室培養。
(七)注意事項
1. 操作臺,先將手清洗乾淨,用酒精消毒。
2. 如果操作臺,風是向外吹的,在操作過程中,盡量少說話,及頭部勿伸入操作臺內。
3. 手不要揮過以打開之培養器皿及操作器皿。
4. 在操作過程中,操作培養皿常換,及刀具每次使用后,用火烤過。
5. 手上酒精未乾時,先不要操作,以免烤刀具時,火燒手。
6. 接種用的刀、鑷子、剪刀等,使用前需用酒精棉花擦拭乾淨,然后在火焰上灼燒。冷卻后,在無菌條件下,將器具在95% 酒精中浸一下,取出后放在酒精燈上燒一下,安放在玻璃架上,待冷卻后使用。
7. 可將刀放在電熱杯的開水中煮沸5分鐘,冷卻后待用。
8. 金屬用具用酒精棉花擦拭乾淨后,風乾。然后用紙或鋁盒,包裝好,于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌,冷卻后待用。