在進行多孔板尤其是96和384孔板細胞培養(yǎng)時，你可能會發(fā)現(xiàn)細胞在孔板中的位置會影響細胞的生長狀態(tài)，特別是處在周邊以及四個角的孔中細胞通常會表現(xiàn)出分布不均等現(xiàn)象，也就是常說的邊緣效應(yīng)（edge effects）。這對我們的實驗造成了很多的不便，特別是對于藥物篩選相關(guān)研究更是無法回避。
    由于多孔板中四邊孔zui直接與外界環(huán)境接觸，受環(huán)境影響也就zui大。
關(guān)于邊緣效應(yīng)的成因，現(xiàn)有的觀點主要有以下兩點：

溫度效應(yīng)
   由于位置效應(yīng)，當我們將鋪好的細胞由室溫轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱時，周邊孔中的細胞更傾向于聚集到相對溫暖的邊緣地帶。結(jié)果就是細胞分布不均，造成一邊細胞過于擁擠增殖受阻，另一邊卻幾乎沒有細胞，zui終必然是長勢不及中間孔。

蒸發(fā)效應(yīng)
   雖然通常細胞培養(yǎng)箱中都會放置一盤雙蒸水以維持培養(yǎng)箱中的濕度，但仍難達到多孔板中的濕度，特別是在培養(yǎng)箱經(jīng)常開關(guān)的情況更是如此。同樣的由于位置效應(yīng)，邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分揮發(fā)的現(xiàn)象就更嚴重。所以經(jīng)常你可能就會看到四周培養(yǎng)基的體積會明顯少于中間孔，而四個角落的孔尤為嚴重。細胞在2乘的培養(yǎng)基中生活會是怎樣的一個情形，想象下腌蘿卜就知道了！當然這種現(xiàn)象在長時間培養(yǎng)時顯現(xiàn)的尤為突出。

解決方法：
棄為上策
   不能解決，就不用這些周邊的孔，這可說是zui直接的方法。同時再在這些孔中加入培養(yǎng)基或PBS以形成護城河，保護中間孔免受蒸發(fā)效應(yīng)影響。但到底來說這也不算是上上策，畢竟損失近1/3孔（96孔瞬間折損至60孔），尤其是對于像腫瘤干細胞常用的低黏附培養(yǎng)板這樣造價不菲的培養(yǎng)板，著實“棄不起”。

室溫預(yù)孵育
   前面提到在做藥物篩選時，位置效應(yīng)讓許多人很困惱。有研究者就專門針對溫度效應(yīng)發(fā)表了一篇方法論文[1]，驗證了前人提出的一種解決位置效應(yīng)的簡易方法是可行的。該方法就是將鋪好的細胞在室溫先放置1h，待細胞完成沉降和貼壁后再放回37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)?？雌饋碓摲桨负唵我仔小捉珜嶋H上作者的實驗依據(jù)建立在24h觀察得到數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，而此時蒸發(fā)效應(yīng)的影響還比較小。因此如果只是短時實驗，相信使用該方法還是不錯的選擇。