詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 促腎上腺皮質激素(1-39)抗體 |
英文名稱 | ACTH (1-39) |
規格 | 0.1ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
出芽短梗霉屎腸球菌 Enterococcus faecium
Bacterial Protein Extraction Reagent/細菌蛋白抽提試劑 細胞名稱
黑色淺灰鏈霉菌 Streptomyces nigrogriseolus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞)5×106cells/瓶×2
人外周血白細胞*培養基100mL
Endogeus Enzymes Blocking Buffer/內源性過氧化物酶封閉液10ml
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
斯氏普羅菲登斯菌 Providencia stuartii
結蛋白(Des)重組蛋白英文名稱:Recombinant Desmin (Des)
窖蛋白(CAV1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Caveolin 1 (CAV1)
角蛋白20(KRT20)重組蛋白英文名稱:Recombinant Keratin 20 (KRT20)
骨涎蛋白(BSP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Bone Sialoprotein (BSP)
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基 規格: 250g 用途: 用于壓力蒸汽滅菌效果評價(GB15981-1995和GB15979-2002)。
內臟肪特異性絲蛋白酶抑制因子(Vaspin)ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)規格:48T/96T
毒蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 1 (CHRM1)規格:48T/96T
基質金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)規格:48T/96T
結蛋白(Des)ELISA Kit for Desmin (Des)規格:48T/96T
微小染色體維持缺陷蛋白2(MCM2)ELISA Kit for Minichromosome Maintenance Deficient 2 (MCM2)規格:48T/96T
軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA Kit for Netrin 1 (Ntn1)規格:48T/96T
信號轉導銜接分子1(STAM1)ELISA Kit for Signal Transducing Adaptor Molecule 1 (STAM1)規格:48T/96T
磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA Kit for Phospholipase C Gamma 1 (PLCg1)規格:48T/96T
甘油三酯(TG)ELISA Kit for Triglyceride (TG)規格:48T/96T
Ⅰ類主要組織相容性復合體E(MHCE)ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class I E (MHCE)規格:48T/96T
環加氧酶2(PTGS2)ELISA Kit for Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2)規格:48T/96T
甘露糖結合蛋白(MBL)ELISA Kit for Manse Binding Lectin (MBL)規格:48T/96T
促腎上腺皮質激素(1-39)抗體前列環素合成酶抗體Yatein中文名:別名:分子式:C22H24O7
軟骨寡聚基質蛋白抗體Fragransin A2中文名:別名:分子式:C20H24O5
T淋巴細胞CD1A抗體Lancifolin C中文名:別名:分子式:C22H28O5
磷酸化周期素B1抗體Lyoniside中文名:別名:分子式:C27H36O12
胞漿型磷脂酶A2抗體Boehmenan中文名:別名:分子式:C40H40O12