詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 脂肪醛脫氫酶抗體 |
英文名稱 | ALDH3A2 |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
DL氨;蛋氨 進口/國產 規格:>99%,BR純度:≥98%
DL天冬氨 進口/國產 規格:0.98純度:≥98%
DL谷氨酰 進口/國產 規格:>98%,BR純度:97%
DL脯氨 進口/國產 規格:0.99純度:≥95%
DL丙氨鹽鹽 進口/國產 規格:0.98純度:≥95%
L谷氨5乙 進口/國產 規格:0.985純度:≥98%
N乙酰DL亮氨 進口/國產 規格:0.98純度:≥98%
N碳芐氧基賴氨,N6CbzL賴氨 進口/國產 規格:98%,BR純度:98%
鹽艾司洛爾(標準品) 進口/國產 規格:>98%,標準品純度:98%
鹽艾司洛爾 進口/國產 規格:>99%,BR純度:≥97%
HMetOtBu.HCL 進口/國產 規格:0.98純度:≥99%
麥芽糖 進口/國產 規格:>98%純度:≥98%
L蘇氨鹽鹽 進口/國產 規格:0.98純度:≥98%
N乙酰L色氨乙 進口/國產 規格:HPLC>98%,BR純度:≥98%
N乙酰DL色氨 進口/國產 規格:0.98純度:≥98%
N酰DL色氨 進口/國產 規格:0.98純度:≥98%
ALOXE3 表皮型脂氧合酶3一抗(魚鱗病相關蛋白) * 0.2ml Protamine sulfate from Salmom
ALPK3 α蛋白激酶3一抗(心肌) * 0.2ml BCIP, disodium salt
CEND1 細胞周期通道和神經細胞分化蛋白1一抗 * 0.2ml Copper(II) acetate, hydrate
DHRS9 短鏈脫酶/還原酶家族9一抗 * 0.2ml Creatine phosphate
DLL3 tch信號通路Delta樣配體3一抗 * 0.2ml Fructose 1,6bisphosphate, 3sodium salt
EME1 減數分裂內切酶EME1一抗 * 0.2ml Fructose 1,6bisphosphate,3sodium salt
FAM3C/ILEI 上皮分泌型FAM3C蛋白一抗 * 0.2ml LAmmonium tartrate
FSTL5 卵泡抑素相關蛋白5一抗 * 0.2ml Potassium carbonate, anhydrate
脂肪醛脫氫酶抗體Pestalotiopsis clavispora分離基物: 紅樹枝(內生)提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法
Alternaria sp.提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗癌活性培養基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Chaetomium gracile分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
Thermoanaerobacter ethanlicus分離基物: 油層水提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 三價鐵還原培養基: 0491生長條件: 65℃存儲條件: 定期移植法
Escherichia coli分離基物: 腹瀉仔豬糞便提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 科研及血清定型培養基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Colletotrichum coccodes提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0014生長條件: 20℃
Clostridium botulinum Type C分離基物: 肉毒中毒山羊肝提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 用于科研及血清定型培養基: 54生長條件: 35存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Rhizobium sp.分離基物: 降香黃檀3年生苗(海南檀)根瘤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 固氮培養基: 63生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Rubulavirus Newcastle disease virus分離基物: 病雞提供形式: 凍結物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 實驗研究其生物學活性,并進一步從基因水平上進行分析。同時,篩選合適的疫苗毒株制備新型疫苗。培養基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;