詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 卷曲螺旋結構域蛋白30抗體 |
英文名稱 | CCDC30 |
規格 | 0.2ml |
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公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
草靈(標準品) 進口/國產 規格:HPLC>98%,標準品純度:0.95
貝托司汀 進口/國產 規格:>98.5%純度:0.97
葉綠素銅鈉鹽 進口/國產 規格:>95%,BR純度:≥98%
新綠原(標準品) 進口/國產 規格:HPLC >98%,標準品純度:≥99%
鹽伊伐布雷定 進口/國產 規格:>98%,BR純度:≥98%
葉黃素; 二羥基d胡蘿卜素 進口/國產 規格:UV>90%,HPLC>80%,BR純度:≥97%
葉黃素; 二羥基d胡蘿卜素 進口/國產 規格:UV>40%,BR純度:≥97%
葉黃素; 二羥基d胡蘿卜素(標準品) 進口/國產 規格:HPLC>85%,標準品純度:≥98%
替卡格雷 進口/國產 規格:>99%,II晶型純度:≥98%
替卡格雷(標準品) 進口/國產 規格:>99%,光學純度>97%,標準品純度:≥98%
鹽雷莫司瓊 進口/國產 規格:>98%,BR純度:≥97%
鹽司維拉姆 進口/國產 規格:BR純度:≥98%
碳司維拉姆 進口/國產 規格:BR;Binding of Phosphate 4.0~7.0mmo1/g純度:≥98%
酰肼;奇特 進口/國產 規格:>99%純度:≥98%
酰肼;奇特(標準品) 進口/國產 規格:HPLC>99%,標準品純度:≥98%
千金藤素 進口/國產 規格:HPLC ≥98%,BR純度:≥95%
ApoB/Apolipoprotein B 載脂蛋白B一抗 * 0.1ml Loratadine
ORP8 氧化固結合蛋白8一抗 * 0.2ml Loratadine
ALOX15B/15 Lipoxygenase 2 花生四15脂氧合酶2一抗 * 0.2ml Melatonine
APOB48R 載脂蛋白B受體一抗 * 0.2ml Melatonine
ARH/LDL receptor adaptor protein 低密度脂蛋白受體銜接蛋白一抗 * 0.2ml Micycline hydrochloride
APOC4/Apolipoprotein CIV 載脂蛋白C4一抗 * 0.2ml Mitoxantrone HCl
HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白結合蛋白一抗 * 0.2ml Mitoxantrone HCl
KAT13D/CLOCK 生物鐘KAT13D蛋白一抗 * 0.2ml Mitoxantrone HCl
卷曲螺旋結構域蛋白30抗體E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體Ethyl 2-(4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxyla別名: 分子式: C13H13NO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
結節性硬化癥蛋白1抗體Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxyla別名: 分子式: C14H13NO4S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
肝細胞核因子4α抗體Ethyl 2-(3-cyano-4-isobutoxyphenyl)-4-methyl-5-thiazolecarboxyla別名: 分子式: C18H20N2O3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
磷化肝細胞核因子4α抗體3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid別名: 分子式: C12H12F2O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
淋巴特異性解旋酶抗體5-Chloro-2-nitrobenzoic acid別名: 分子式: C7H4ClNO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
HRAS樣抑制因子2抗體2-Methyl-4-nitrobenzoic acid別名: 分子式: C8H7NO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
熱休克蛋白家族40抗體6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole hydrochloride別名: 分子式: C12H14ClFN2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
糖蛋白P43抗體Febuxostat別名: 分子式: C16H16N2O3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: