詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 胰羧肽酶B2抗體 |
英文名稱 | CPB2 |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
咪唑英文名稱:Mebendazole保存:20℃,避光規格:50mg核受體輔助抑制因子2一抗
蝶呤英文名稱:Methotrexate保存:20℃,避光規格:100mg跨膜受體蛋白tch1一抗
過氧酰英文名稱:Benzoyl peroxide保存:20℃,避光規格:100mg壬基一抗
10%A晶型咪唑英文名稱:10%A crystal type of mebendazole保存:20℃,避光規格:50mg老年性癡呆蛋白APH2一抗
格列本脲英文名稱:Glibenclamide保存:20℃,避光規格:50mgG21蛋白質一抗
英文名稱:Etamsylate保存:20℃,避光規格:100mg腈水解酶1一抗
奮乃靜英文名稱:Fen Naijing保存:20℃,避光規格:100mg神經腫瘤va2抗原一抗
對羥酰英文名稱:Phydroxy phenyl acetamide保存:20℃,避光規格:50mg谷受體調節蛋白2一抗
對酰英文名稱:Para toluene sulfonate保存:20℃,避光規格:100mg富含亮重復結構域蛋白2一抗
溴東莨菪英文名稱:Scopolamine Butylbromide保存:20℃,避光規格:100mg孤兒核受體TAK1一抗
地塞米松英文名稱:Dexamethasone保存:20℃,避光規格:100mg核仁蛋白一抗
蘆薈大黃素英文名稱:Aloe Emodin保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支嗜中性粒細胞胞漿因子4一抗
大黃素英文名稱:Physcion保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支嗅球蛋白1一抗
大黃英文名稱:Chrysophal保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支含氧輔酶A轉移酶1一抗
豆甾、豆固英文名稱:Soy sterol, stigmasterol保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支抑瘤素M一抗
D(十)無水葡萄糖英文名稱:D (ten) anhydrous glucose保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支抑瘤素M受體一抗
地奧司明英文名稱:Diosmin保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支胚胎干細胞關鍵蛋白190一抗(N端)
胰羧肽酶B2抗體ea層析柱 親和層析柱12mL (1.5*8)486-90-896T破骨細胞刺激子1(OSF)HPLC≥98%白介素25檢測試劑盒20mgCG36877-69-試劑白細胞衍生趨化子2(LECT2)200mg層析柱 親和層析柱12mL (1.5*8)529-84-096T肝素結合性表皮生長子(HBEGF)HPLC≥98%白介素24檢測試劑盒20mgAlfacalcidol7220-7劑谷胱甘肽S轉移酶α4(GSTα4)
200mg層析柱 親和層析柱12mL (1.5*8)529-84-096T肝素結合性表皮生長子(HBEGF)HPLC≥98%白介素24檢測試劑盒20mgAlfacalcidol7220-7試劑谷胱甘肽S轉移酶α4(GSTα4)15mg層析柱 親和層析柱30mL (2.3*10)482-82-696T饑餓素(GHRL)HPLC≥98%白介素23受體檢測試劑盒20mgp-P38MAPK7220-學試劑中間α-球蛋白抑制子H5(ITIH5)
15mg層析柱 親和層析柱30mL (2.3*10)482-82-696T饑餓素(GHRL)HPLC≥98%白介素23受體檢測試劑盒20mgp-P38MAPK7220-713114-27-782747-36-296T饑餓素(GHRL)HPLC≥98%白介素23A檢測試劑盒20mgOT7220學試劑Ⅹ組脂酶A2(PLA2G10)
30mg層析柱 親和層析柱30mL (2.3*10)13114-27-782747-36-296T饑餓素(GHRL)HPLC≥98%白介素23A檢測試劑盒20mgOT722學試劑Ⅹ組脂酶A2(PLA2G10)5mg層析柱 親和層析柱50mL (2.5*16)13114-27-72107-77-996T饑餓素(GHRL)HPLC≥98%白介素23檢測試劑盒20mgSM-IgG-Ab722化學試劑剪接子3B亞3(SF3B3)
5mg層析柱 親和層析柱50mL (2.5*16)13114-27-72107-77-996T饑餓素(GHRL)HPLC≥98%白介素23檢測試劑盒20mgSM-IgG-Ab722學試劑剪接子3B亞3(SF3B3)10mg層析柱 親和層析柱50mL (2.5*16)13114-27-722084-94-296Tδ-促睡眠肽(δSIP)HPLC≥98%白介素22檢測試劑盒20mgPC4430-25化學試劑整合素α6(ITGα6)