詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 著絲粒蛋白P抗體 |
英文名稱 | CENPP |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
原膜散酯標準品Rat17-KS ELISA KIT純度:0.993
均聚物聚標準品Rat 17-ANP ELISA Kit純度:0.99
甲溴后馬標準品Rat 17-ANP ELISA Kit純度:0.996
氫溴后馬標準品Rat17-Hydroxycorticosteroids ELISA KIT純度:0.999
組標準品Rat 15-lipoxygenase ELISA Kit純度:0.996
高密度聚乙標準品Rat 15-lipoxygenase ELISA Kit純度:0.995
己基間二標準品Rat 14-3-3 protein ELISA Kit純度:0.999
Macrobrachium rosenbergii davirus,MrNV ELISA Kit羅氏沼蝦諾達病毒(MrNV)ELISA試劑盒*規格:96T/48T常溫,避光含量測定醋酸己定規格:50mg
α-bungarotoxin,α-BGT ELISA Kitα-銀環蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒 *規格:96T/48T常溫,避光檢查用2,6-二基酚規格:50mg
Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA Kit大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒 進口/分裝規格:96T/48T常溫,避光含量測定氟尿嘧啶規格:100mg
Aflatoxin,AFT ELISA Kit(AFT)ELISA試劑盒 進口/原裝規格:96T/48T常溫,避光含量測定環戊噻嗪規格:50mg
Bacillus thuringiensis,BT ELISA Kit蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒 *規格:96T/48T常溫,避光含量測定基多巴規格:50mg
Bovine acetone ELISA Kit牛酮檢測(acetone)ELISA試劑盒 *規格:96T/48T常溫,避光UV法溶出檢查芬那酸規格:100mg
著絲粒蛋白P抗體通用轉錄因子2H肽1抗體6-Aminouracil別名: 分子式: C4H5N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
甘油激酶抗體Peri acid別名: 8-Ami-naphthalenesulfonic acid分子式: C10H9NO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
線粒體甘油三磷脫氫酶2抗體4-Aminosalicylic acid別名: 分子式: C7H7NO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
谷氨酰合成酶/谷氨氨連接酶抗體2-Amino-5-nitrothiazole別名: 分子式: C3H3N3O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
甘油三磷脫氫酶1抗體4-Aminophenylacetic acid別名: 分子式: C8H9NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
神經節苷酯抗體3-Ami-phenyl-2-pyrazolin-5-one別名: 分子式: C9H9N3O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
谷胱甘肽S轉移酶A3抗體1-Amino-2-methylanthraquinone別名: 分子式: C15H11NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
磷化GADD153抗體2-Amino-6-nitrobenzothiazole別名: 分子式: C7H5N3O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: