詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 鈣結合蛋白樣39抗體 |
英文名稱 | CAB39L |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
少根根霉現貨,ATCC菌株
白腐菌培養(yǎng),ATCC菌株
蕁麻保存,ATCC菌株
小刺售價,ATCC菌株
婁地現貨,ATCC菌株
產紫培養(yǎng),ATCC菌株
淡紫保存,ATCC菌株
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轉化生長因子α(TGFα)ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa)規(guī)格:48T/96T
窖蛋白(CAV1)ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1)規(guī)格:48T/96T
α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA Kit for Alpha-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)規(guī)格:48T/96T
成纖維細胞生長因子10(FGF10)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)規(guī)格:48T/96T
組蛋白H3(H3)ELISA Kit for Histone H3 (H3)規(guī)格:48T/96T
腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)規(guī)格:48T/96T
白介素10(IL10)ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)規(guī)格:48T/96T
白介素16(IL16)ELISA Kit for Interleukin 16 (IL16)規(guī)格:48T/96T
組織蛋白酶K(CTSK)ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)規(guī)格:48T/96T
基質金屬蛋白酶13(MMP13)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)規(guī)格:48T/96T
凋亡相關因子配體(FASL)ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)規(guī)格:48T/96T
酰膽堿酯酶(AchE)ELISA Kit for Acetylcholinesterase (AchE)規(guī)格:48T/96T
鈣結合蛋白樣39抗體血紅蛋白β抗體Mestanolone別名: 分子式: C20H32O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
透明質結合蛋白2抗體Nandrolone undecyla別名: 分子式: C29H46O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
透明質及粘蛋白2抗體4-Chlorodehydromethylstosrone別名: 分子式: C20H27ClO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
透明質合成酶3抗體stosrone undecanoa別名: 分子式: C30H48O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
熱休克蛋白56抗體Mesrolone別名: 分子式: C20H32O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體stosrone phenylpropiona別名: 分子式: C28H36O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
熱休克蛋白相關蛋白4抗體Oxandrolone別名: 分子式: C19H30O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
透明質合成酶2抗體Exemestane別名: 分子式: C20H24O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: