詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 周期素B3抗體 |
英文名稱 | Cyclin B3 |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
磺保泰松標準品 規格:200mg 英文名稱:Sulfinpyrazone
異舒普林鹽鹽標準品 規格:200mg 英文名稱:Isoxsuprine Hydrochloride
一水天冬酰標準品 規格:200mg 英文名稱:Asparagine Mohydrate
糖二鈣標準品 規格:200mg 英文名稱:Calcium Saccharate
芹菜苷元7葡萄糖標準品 規格:30mg 英文名稱:Apigenin7glucoside
麥角固標準品 規格:50mg 英文名稱:Ergosterol
平標準品 規格:100mg 英文名稱:Clozapine
平分離度用混合物標準品 規格:30mg 英文名稱:Clozapine Resolution Mixture
鹽依達比星標準品 規格:50mg 英文名稱:Idarubicin Hydrochloride
素標準品 規格:200mg 英文名稱:Testosterone Propionate CIII
NFmocN'三基D半胱 進口、國產 FmocDCys(Trt)OH 含量:特純,98%
NFmocN'三基L組 進口、國產 FmocHis(Trt)OH 含量:特純,98%
Nβ酰L組 進口、國產 LCarsine 含量:BR,99%
N基酰基磺 進口、國產 ACES 含量:FMP,90%
N基81磺 進口、國產 1,8ANS 含量:高純
N酰L纈酰甘酰L精對基鹽鹽 進口、國產 NBZValGlyArgPNA•HC1 含量:BR,98%
N酰甘 進口、國產 HippuricAcid 含量:BR,99%
N芐基甘酯 進口、國產 NBenzylglycineethylester 含量:BR,97%
N芐氧基L酪酯 進口、國產 BTEE 含量:BR,98%
N芐氧羰基DL基 進口、國產 ZDLphenylalanine 含量:特純,98%
周期素B3抗體環化核苷調控陽離子通道蛋白亞型4Doxapram hydrochloride monohydra別名: 分子式: C24H33ClN2O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
HEAT重復內含蛋白8蛋白抗體Depofemin別名: 分子式: C26H36O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
雄激素調節樣蛋白抗體Ethynyl estradiol別名: 分子式: C20H24O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
雄激素調節蛋白2抗體Quinestrol別名: 分子式: C25H32O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
角化蛋白S100A18抗體tracaine hydrochloride別名: 分子式: C15H25ClN2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
丙型肝炎病毒NS4B抗體Prilocaine別名: 分子式: C13H20N2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
異質性核糖核蛋白C1/C2抗體Dibucaine hydrochloride別名: 分子式: C20H30ClN3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
異質性核糖核蛋白RPrilocaine hydrochloride別名: 分子式: C13H21ClN2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: