詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 12號染色體開放閱讀框42抗體 |
英文名稱 | C12ORF42 |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
奧沙普秦標準品Rat Motilin ELISA Kit純度:0.999
氧雄龍標準品Rat CA199 ELISA Kit純度:0.999
奧沙利鉑對照品標準品Rat CA199 ELISA Kit純度:0.998
唑西林標準品Rat Vitamin C ELISA Kit純度:--
鄰甲磺酰標準品Rat Vitamin B6 ELISA Kit純度:0.98
奧塞米韋相關物質A標準品Rat microalbunminuria ELISA KIT純度:0.998
磷奧斯他韋標準品Rat DPD ELISA Kit純度:0.985
Porcine Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 *規格:96T/48T121532-200501TLC法鑒別蓽澄茄規格:0.25g
Porcine omerase,TE ELISA Kit豬端粒酶(TE)ELISA試劑盒*規格:96T/48T121533-200702TLC法鑒別土鱉蟲(地鱉)規格:1g
Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒進口/分裝規格:96T/48T121534-200602TLC法鑒別虎仗葉規格:1g
Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒進口/原裝規格:96T/48T121535-200501TLC法鑒別高麗紅參規格:6g
Porcine Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒*規格:96T/48T121536-200501TLC法鑒別人工虎骨規格:0.5g
Porcine Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒*規格:96T/48T121537-200501TLC法鑒別白土苓(短柱肖菝葜)規格:10g
12號染色體開放閱讀框42抗體大鼠精氨酸加壓素受體1A(AVPR1A)分析檢測試劑盒ELISA試劑盒
硝酸鹽陰性不動桿菌豚鼠內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
傷寒沙門氏菌豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒
咽峽炎鏈球菌豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒
禽呼腸孤病毒豚鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒
馬爾他布魯氏菌 生物Ⅲ型豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒
溶組織梭菌豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒
產氣莢膜梭菌 毒素D型豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
禽腺病毒(3型)豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
傳染性喉氣管炎病毒豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒
家蠶微孢子蟲CQ1株豚鼠內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
巨型艾美耳球蟲豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
柔嫩艾美耳球蟲豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
毒害艾美耳球蟲廣東株豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
牛葡萄球菌豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒
Fusarium moniliforme豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒
Fusarium verticillioides豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
Massilia dura sp. nov.豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒
Massilia sp.豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
Stachybotrys chlorohalonata豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒