詳細介紹
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 骨形態發生蛋白3抗體 |
英文名稱 | BMP3 |
規格 | 0.1ml |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
可溶性腺苷酸環化酶(sAC)腸沙門氏菌腸亞種波那雷恩血清型拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica serotype Bonariensis
鳥氨酸脫羧酶(ODC)大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
蛋白酪氨酸激酶(PTK/CD115)熒光假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
蛋白酪氨酸酸酶(PTP/PTPase/CD148)稻平臍蠕孢拉丁屬名: Bipolaris oryzae Sawada
腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)北京擲孢酵母拉丁屬名: Sporobolomyces beijingensis
多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)杏鮑菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)根瘤菌拉丁屬名: Mesorhizobium chacoense
果糖1,6二酸縮酶(FDA)柔嫩艾美耳球蟲拉丁屬名: tenella
組織蛋白酶D(cath-D) Chitinophaga sp.拉丁屬名: Chitinophaga sp.
激素敏感性脂肪酶(HSL) 停滯棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium stationis
胰激肽原酶(PK) 小單孢菌用途: 代謝產物具有抗菌活性。
烏頭酸酶2(ACO-2) 細極鏈格孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
26S蛋白酶體(26S PSM) 釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
周期素依賴性激酶4(CDK-4) 婁徹鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces rochei
胎盤堿性酸酶(PLAP) 枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
受體酪氨酸激酶(RTKs) 甘薯長喙殼拉丁屬名: Ceratocystis fimbriata Ellis & Halst.
骨形態發生蛋白3抗體GTP酶IMAP家族成員4抗體17α-Neriifolin中文名:別名:17α-Digitoxigenin thevetoside分子式:C30H46O8
GTP酶IMAP家族成員5抗體Ergosterol peroxide glucoside中文名:過氧化麥角甾醇葡萄糖苷別名:Ergosterol peroxide 3-O-β-D-glucopyraside分子式:C34H54O8
G蛋白調節誘導神經突增生蛋白2抗體Mannioside A中文名:別名:Pengenin 3-O-α-L-rhampyrasyl-(1→3)-β-D-glucopyraside分子式:C39H62O13
GTP酶IMAP家族成員7抗體3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene中文名:別名:分子式:C28H42
GTP酶IMAP家族成員8抗體Ergosterol中文名:麥角甾醇別名:Ergosta-5,7,22-trien-3-ol分子式:C28H44O
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。