詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體 |
英文名稱 | ASF1A |
規格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
熱紫鏈霉菌 Streptomyces thermoviolaceus
稀疏鏈霉菌 Streptomyces sparsogenes
滅癌素鏈霉菌 Streptomyces gancidicus
柯奈尼亞小單胞菌 Micromospora chokoriensis
豐后鏈霉菌 Streptomyces bungoensis
仙臺鏈霉菌 Streptomyces sindenensis
中殺菌素鏈霉菌 Streptomyces mauvecolor
灰繡赤鏈霉菌 Streptomyces griseorubigisus
洛蒙德鏈霉菌 Streptomyces lomondensis
桑格利娜氏鏈霉菌 Streptomyces sanglieri
突觸融合蛋白1B(STX1B)ELISA Kit for Syntaxin 1B (STX1B)規格:48T/96T
K-酰轉移酶5(KAT5)ELISA Kit for K-Acetyltransferase 5 (KAT5)規格:48T/96T
干擾素α7(IFNα7)ELISA Kit for Interferon Alpha 7 (IFNa7)規格:48T/96T
絲脫水酶(SDS)ELISA Kit for Serine Dehydratase (SDS)規格:48T/96T
樣糖基轉移酶(LARGE)ELISA Kit for Like Glycosyltransferase (LARGE)規格:48T/96T
表皮生長因子途徑底物蛋白1(EPN1)ELISA Kit for Epsin 1 (EPN1)規格:48T/96T
鈣黏蛋白10(CDH10)ELISA Kit for Cadherin 10 (CDH10)規格:48T/96T
原肌球調節蛋白3(TMOD3)ELISA Kit for Tropomodulin 3 (TMOD3)規格:48T/96T
異烯半胱氧化酶1(PCYOX1)ELISA Kit for Prenylcysteine Oxidase 1 (PCYOX1)規格:48T/96T
轉移抑制因子1(MTSS1)ELISA Kit for Metastasis Suppressor 1 (MTSS1)規格:48T/96T
糖磺基轉移酶5(CHST5)ELISA Kit for Carbohydrate Sulfotransferase 5 (CHST5)規格:48T/96T
腺苷合酶(ADSS)ELISA Kit for Adenylosuccinate Synthase (ADSS)規格:48T/96T
細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體human toll-like receptor 2,TLR2 檢測試劑盒 toll樣受體2* 規格: 48T/96T
Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA 檢測試劑盒 組織型纖溶酶原激活劑* 規格: 48T/96T
Human Tissue factor,IF 檢測試劑盒 組織因子* 規格: 48T/96T
Human thyroxineT4 檢測試劑盒 甲狀腺素* 規格: 48T/96T
Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG 檢測試劑盒 甲狀腺結合球蛋白* 規格: 48T/96T
human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI 檢測試劑盒 甲狀腺刺激免疫球蛋白* 規格: 48T/96T
Human Thyroglobulin,TG 檢測試劑盒 甲狀腺球蛋白* 規格: 48T/96T