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FISH技術介紹及應用
發布時間：2019-11-04
熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是應用熒光染料標記探針DNA，以熒光標記取代同位素標記組織、細胞核或染色體DNA進行雜交的一種研究DNA序列在染色體上位置的新的原位雜交方法，常被稱為是生命科學的“釣魚”技術。利用這一技術可對待測核酸定性、定位或相對定量的分析。
傳統的原位雜交方法是將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交后采用放射自顯影進行檢測，這種檢測限制了雜交技術的廣泛應用，20世紀末由于人類基因組計劃的啟動，FISH技術得到了迅速的發展和廣泛的應用。
FISH技術是一種非放射性原位雜交技術，結合了生物學和細胞遺傳學，將真核生物細胞的染色體區帶與特定DNA片段聯系起來的一種快速而直接的檢測手段，廣泛應用于生物學研究中，可作為免疫組化表達初步篩查的方法，提高了基因定位的準確性。
 | 利用DNA堿基對的互補性，將直接標記了熒光的單鏈DNA(探針)和與其互補的目標樣本的DNA(玻片上的標本)雜交，通過觀察熒光信號在染色體上的位置反映相應染色體的情況。 |
通過熒光顯微鏡觀察雜交信號。FISH在熒光顯微鏡下可以確認出腫瘤所在的位置。
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因其安全性高、特異性好、快速準確，可以同時檢測多種序列、使用周期長，在基因定位、染色體結構分析與數目測定、人類產前診斷、病毒感染分析、腫瘤遺傳學等方面都發揮了不容小覷的作用。 今后在研究細胞核骨架與基因表達的關系、基因擴增，基因組結構與哺乳動物的染色體調控等領域將會起到積極的作用。