引起 ELISA 測定結果與文獻報導不一致的原因主要有三點,試劑因素、標本因素和操作因素。試劑因素:●1. 試劑應選擇靈敏度高、特異性好、穩定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準標準有差異,還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應等因素都會導致對樣本的檢測結果不一致。如:有的廠家酶標板孔間 CV 值大于 20%,標記酶的活性及顯色液的穩定性比較差,使用劣質的試劑必然導致結果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,選擇剛出廠的試劑盒為宜。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產 ELISA 的指標范圍,用一種指標來冒充其它指標,造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。標本因素和操作因素:● 血清是常用的 ELISA 標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致,分為內源性物質和外源性物質兩種。 內源性物質:有人認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響檢測結果。常見的干擾物質有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫源性誘導的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應物質和其它物質等。外源性物質:外源性物質常常是由于用于 ELISA測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。
人類成纖維細胞(多種種屬)實驗科研認可品牌
抗中性粒細胞胞漿抗體ELISA試劑盒
檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產品規格:96T/48T。
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
經營種類:進口分裝和原裝、國產
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標本:血清、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預期應用:ELISA法定量測定血清、、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
●ELISA試劑盒17個操作技巧●: 1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。 3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。 4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。 5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。 6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。 7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。 8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。 9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。 10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。 11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。 13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。 14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。 15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。 16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。 17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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編輯:小檀20181019
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