ITC等溫滴定量熱儀主要用于研究生物分子相互作用的完整熱力學參數,包括結合常數、結合位點數、摩爾結合焓、摩爾結合熵、摩爾恒壓熱容和動力學參數,比如蛋白質與核酸作用。ITC的應用范圍各種生物分子的相互作用;酶促反應動力學;蛋白質折疊/去折疊;RNA折疊。
ITC等溫滴定量熱儀儀器的特點和用途:
等溫滴定微量熱儀系統直接測量生物化學結合過程中釋放或吸收的熱量,然后計算出結合親和力、化學計量、焓和熵。樣品制備和系統優化工作量最少,數據生成快速、方便。等溫滴定微量熱儀僅需少量樣品即可進行各種研究,包括表征小分子、蛋白質、抗體、核酸、脂類和其他生物分子的分子間相互作用,也可用于測量酶動力學。
ITC檢測方式與化學反應中的酸堿滴定法相似,在ITC測定中,首先將一種反應物置于一個溫控樣品池中,并通過一個熱電偶回路與一個參比池相偶聯,樣品池和參比池處于相同的外部環境。特定的滴定劑(按實驗需要選擇)定量滴加到樣品池中,當樣品與滴定劑發生反應時,樣品池和參比池的溫度會發生變化,反應變化的能量可以被ITC檢測儀靈敏地檢測出來,并通過正反饋或負反饋觸發恒溫裝置保持溫度恒定。
如果要進行分子間相互作用的研究,如研究蛋白質與蛋白質的相互作用、蛋白質與糖相互作用、藥物與蛋白質相互作用、小分子物質與蛋白質間相互作用、酶促反應動力學分析、核酸與核酸相互作用、核酸與小分子相互作用等,可以考慮運用等溫滴定量熱技術進行檢測。
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