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艱難梭菌（Clostridium difficile，CD）是一種產毒素的專性厭氧革蘭陽性芽孢菌，廣泛分布于人和動物的腸道及環境中。因其對氧極為敏感，在傳統培養基上分離培養較困難，故命名為艱難梭菌。

在過去的十年里，艱難梭菌感染的頻率和嚴重程度在世界范圍內不斷增加，成為引起抗生素相關性腹瀉和院內感染的主要病原菌之一。2013年和2019年美國CDC《抗生素耐藥威脅報告》將艱難擬梭菌列為緊急威脅的耐藥菌。

艱難梭菌感染的危險因素：

·抗生素使用(2-3月使用以上)

·住院(2-3個月長期住院)

·高齡(＞65歲)

·鼻飼管和胃腸道治療

·胃酸抑制藥物-質子泵抑制劑和組胺2(H2)受體拮抗劑

·免疫抑制狀態

·炎癥性腸病

·胃腸道手術

近年來，我國部分地區已檢測出高毒力株，表明艱難梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)已對我國臨床構成了威脅。同時，研究表明我國的CDI分子流行病學特征具有自身特點，使得CDI的防控形勢十分嚴峻。因此，臨床快速、準確診斷CDI，對改善患者預后及節省我國醫療支出具有重要意義。

2017年我國發布了《中國成人艱難梭菌感染診斷和治療專家共識》，將艱難梭菌感染診斷標準更新為：患者出現中至重度腹瀉或腸梗阻，并滿足以下任一條件：（1）糞便檢測CD毒素或產毒型CD結果陽性；（2）內鏡下或組織病理檢查顯示偽膜性腸炎。

目前，艱難梭菌的檢測方法可分為實驗室檢測和臨床診斷策略。實驗室檢測主要為菌株檢測、毒素的核酸檢測和毒性檢測。

菌株檢測中，厭氧培養法費用較低、操作簡單，但仍需生物化學反應鑒定且無法判定是否為產毒株，因此后續可通過PCR法或MALDI-TOF MS兩種技術對典型的艱難梭菌菌落進行鑒定。

2019年發布的《MALDI - TOF MS在臨床微生物鑒定中的標準化操作專家共識》為臨床微生物的高效鑒定提供了規范性指導。目前，國內已有實驗室使用MALDI-TOF MS技術對經培養法獲得的艱難梭菌疑似菌株進行準確鑒定，提升了臨床實驗室鑒定艱難梭菌的水平及效率。

雖然目前艱難梭菌的檢測方法有多種，但糞便培養仍然是艱難梭菌檢測的金標準。在得到純培養的菌株后，后續還對培養后的菌株進行毒素分型、分子分型，并檢測其耐藥性，方便臨床根據耐藥性結果給患者對癥下藥，減少抗生素濫用風險。除此之外，還能夠研究其傳播能力（如芽孢形成、黏附能力等）與傳播進化機制，預防疾病的傳播。

《艱難梭菌感染診斷（T/CPMA 008-2020）》

在艱難梭菌糞便培養培養時，需要先使用無水乙醇對糞便進行前處理，然后使用特殊的培養基CCFA或CDMN，嚴格厭氧培養48-72h。

傳統培養方法：采用厭氧產氣袋培養。但由于產氣袋生成厭氧環境時間較長（40分鐘以上），細菌暴露在有氧環境中的時間較長，導致艱難梭菌檢出率偏低。

最新培養方案：如今用戶可選擇采用智能厭氧微生物培養系統，實現更加嚴格的厭氧培養環境。例如，浙江省疾病預防控制中心，配合采用了DW-100A-K智能厭氧微生物培養系統，厭氧環境的生成時間大幅縮短，避免樣本長時間暴露在有氧環境中，且生成氣體環境嚴格，大大提高了艱難梭菌檢出率。

DW-100A-K系列 智能厭氧微生物培養系統

儀器服務于各類厭氧菌微需氧菌和嗜二氧化碳菌的培養、檢驗，可根據需要選擇特定氧氣濃度（0%-15%可選）和CO₂濃度（5%-15%可選）。儀器能快速生成環境，微需氧最快約2 min，厭氧最快約4 min，儀器穩定可靠，確保重現性100%。

設備自帶五級自檢質控（氣體輸入氣壓檢測、罐體連接性檢測、罐體泄漏性檢測、罐體密封性檢測、催化劑活性檢測），確保培養罐氣密性，嚴格保障厭氧環境。

產品優勢：

1、一機多用：厭氧、微需氧和嗜CO₂培養；

2、快速生成環境：微需氧、CO₂最快2 min，厭氧最快4 min；

3、脫機培養：培養罐可從儀器上卸載、獨立控制，設置不同培養環境，培養過程密封，避免樣本泄漏；

4、罐體靈活配置：多種罐體可選，滿足不同培養需求；

5、QA質控軟件：培養前5級質控檢測，確保重現性100%。