核酸蛋白 全能檢測
如果你還不知道熒光定量PCR儀可以用來做蛋白檢測和分析,
那你就是“奧特曼”啦!
如果你正好在開展蛋白尤其是膜蛋白相關的科研工作,
那么恭喜你,
你又可以多一個好使的研究工具啦!
它就是新一代全光譜熒光定量PCR儀
qTOWERiris系列
全光譜檢測,拓展蛋白應用
qTOWERiris突破性地將檢測光譜范圍拓寬到了波長更短的紫外光區域,覆蓋從近紫外UVA到近紅外NIR的全光譜范圍,波長從360nm到730nm。這一革新性的變化,大大擴展了熒光定量PCR儀的應用場景。
1、 近紫外光區域的核酸檢測應用,為做核酸多重檢測的用戶提供了更多的選擇,比如可以檢測ATTO390、ATTO425核酸標記熒光染料的信號;
2、 蛋白檢測方面的應用,比如說可以利用蛋白熔解曲線分析功能,開展CPM、ANS等熒光染料標記的蛋白熱穩定性檢測、蛋白與配體互作研究、蛋白結晶和儲存體系優化等;
在蛋白相關研究中,膜蛋白以其強大的功能性和生物學活性,成為非常重要的研究靶點,如細胞的增殖和分化、能量轉換、信號轉導、物質運輸等,都與膜蛋白息息相關,而且估計有60%左右的藥物作用都與膜蛋白有關。
由于在膜蛋白樣品制備過程中,需要用到一定濃度的表面活性劑,來使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態下膜蛋白結構和功能的穩定性,因此膜蛋白樣品溶液中往往含有較多的表面活性劑。如果用普通的熒光染料如SYPRO Orange去標記膜蛋白,因其溶解性不好、背景噪音高而達不到好的檢測效果,此時如果換成CPM熒光染料(C24H22N2O4)就能很好地實現膜蛋白熔解曲線檢測和分析。
CPM的激發光Ex為384nm,檢測光Em為470nm,在近紫外區域,那么問題來了,普通的熒光定量PCR儀,激發光譜往往從450nm左右的藍光區域開始,沒有辦法實現CPM的檢測。而耶拿公司的qTOWERiris的紫外通道,檢測光譜正好匹配CPM染料,很好地滿足了CPM標記的膜蛋白的高靈敏度檢測。
除了CPM熒光染料,ANS(8-苯胺基-1-萘磺酸)也是一種常用的蛋白標記熒光染料,和蛋白的結合性好,本底低。ANS的激發光Ex為380nm,檢測光Em為470nm,也正是位于qTOWERiris紫外通道的檢測范圍。因此,qTOWERiris能為開展蛋白研究的用戶提供非常方便的熔解曲線分析,進而快速獲得蛋白熱穩定性、蛋白和小分子互作、蛋白結晶條件優化等方面的信息。
典型的蛋白熔解曲線結果:
圖1. 蛋白熔解曲線原始信號圖
圖2. 蛋白熔解曲線峰值圖
?qTOWERiris還能為您帶來可靠的檢測結果和人性化的使用體驗。
溫控精準,重復性好
延續了耶拿PCR儀經典的鍍金純銀樣品槽和快準穩的高速PCR技術,最大升溫速率可達8℃/s,溫度準確性±0.1℃,精準的溫控是實現準確熔解曲線分析的重要前提,再結合先進的光學檢測系統,不存在樣品間的邊緣效應,提供更好的檢測重復性。
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