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恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):Ghrelin 抗體在文獻(xiàn)中的引用
閱讀：882 發(fā)布時(shí)間：2019-12-27| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 634.5KB |
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杏仁核電點(diǎn)燃致癇大鼠血清與下丘腦 Ghrelin 表達(dá)的變化
李 楊1，2， 王 峰1，3， 劉 諍1，3， 楊光明1， 張 震1， 楊 武1， 孫 濤1，3
( 1． 寧夏醫(yī)科大學(xué)顱腦疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，銀川 750004; 2． 寧夏醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，銀川 750001; 3． 寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院神經(jīng)外科，銀川 750004)
摘要: 目的 觀察杏仁核電點(diǎn)燃大鼠血清與下丘腦中神經(jīng)肽 Ghrelin 表達(dá)的變化趨勢(shì)，并探討其原因及意義。
方法 健康雄性 SD 大鼠 64 只，隨機(jī)分為空白組( n = 8) 、假手術(shù)組( n = 8) 和點(diǎn)燃組( n = 8) ，點(diǎn)燃組以后一次刺激為零點(diǎn)，再分為 3、6、12、24、48 和 72h 六個(gè)亞組，每個(gè)亞組 8 只。空白組不予處理; 假手術(shù)組只植入電極不予刺激; 點(diǎn)燃組植入電極后給予電刺激，制作杏仁核點(diǎn)燃致癇膜型。采用 ELISA 法檢測(cè)血清中辛?；?Ghrelin 的濃度，并應(yīng)用免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量 PCＲ 技術(shù)分析下丘腦中辛?；?Ghrelin 與 Ghrelin mＲ-NA 的表達(dá)情況。結(jié)果 假手術(shù)組與空白組比較，表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＞ 0． 05) ; 與假手術(shù)組比較，點(diǎn)燃組大鼠血清中辛酰基化 Ghrelin 與下丘腦中辛?；?Ghrelin 與 Ghrelin mＲNA 的表達(dá)水平均顯著降低( P ＜ 0． 05) ，并且二者在各時(shí)間點(diǎn)的變化趨勢(shì)基本一致，即在癲癇發(fā)作后 3h 外周血中辛?；疓hrelin 的濃度與下丘腦中辛?；?Ghrelin 及 GhrelinmＲNA 表達(dá)均降低，6h 繼續(xù)降低，在 12h 反彈出現(xiàn)一個(gè)峰值，而后在24、48、72h 逐步降低。結(jié)論 癲癇發(fā)作后，血清與下丘腦中神經(jīng)肽 Ghrelin 水平均降低且變化趨勢(shì)是一致的，通過檢測(cè)血清中辛?；疓hrelin 水平，可以反映下丘腦中相應(yīng)神經(jīng)肽的變化趨勢(shì)，可能成為臨床癲癇診斷和療效評(píng)估的一種新型檢測(cè)指標(biāo)。
關(guān)鍵詞: 杏仁核; 點(diǎn)燃; 癲癇; 神經(jīng)肽
中圖分類號(hào): Ｒ338． 2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A
Ghrelin 是一種由 28 個(gè)氨基酸組成的具有多種生理功能的胃動(dòng)素相關(guān)的神經(jīng)肽。目前研究證實(shí)，它與癲癇發(fā)作有關(guān)。本研究通過杏仁核電點(diǎn)燃法建立大鼠癲癇模型，應(yīng)用 ELISA、免疫組化以及實(shí)時(shí)熒光定量 PCＲ 技術(shù)，檢測(cè)大鼠血清辛?；?Ghrelin 和下丘腦中 Ghrelin 的表達(dá)水平，并觀察二者在大鼠癲癇發(fā)作后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況，初步探討其變化的原因及意義。
1 材料與方法
1． 1 ELISA 試劑盒及辛?；?Ghrelin 抗體( 上海恒遠(yuǎn)生物有限公司) ; 兔超敏二步法免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒 PV － 9001 與 DAB 顯色試劑盒ZLI9017( 北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司) ; 實(shí)時(shí)熒光定量 PCＲ 反應(yīng)試劑盒#K1621 逆轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)與即用型 2X 預(yù)混母液( 美國(guó) Thermo 公司) ; 引物合成( 上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司) 。1． 2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 清潔級(jí) 6 ～ 8 周齡雄性Sprague － Dawley 大鼠由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體重 250 ～ 280g，單籠飼養(yǎng)。溫度保持在 20 ～ 23℃，濕度 8% ～ 10% ，自由飲食，晝夜節(jié)律。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組( n = 8) 、假手術(shù)組( n = 8) 、點(diǎn)燃組( n = 48) ，點(diǎn)燃組以后一次刺激結(jié)束開始計(jì)算，分為 3、6、12、24、48 和 72h 六
個(gè)亞組( n = 8) ［1］?？瞻捉M不作處理，假手術(shù)組只植入電極不予刺激; 點(diǎn)燃組植入電極并給予電刺激，制作杏仁核點(diǎn)燃癲癇模型。
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