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苯丙氨酸檢測試劑盒詳細(xì)說明書分析
閱讀：1118 發(fā)布時間：2014-10-22苯丙氨酸檢測試劑盒（本公司可用Elisa法測定含量）
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：苯丙氨酸檢測試劑盒（細(xì)菌抑制法） 英文名稱： Phenylalanine Kit（BIA）
【包裝規(guī)格】 96人份/盒
【預(yù)期用途】
用于檢測采集在S&S 903# 濾紙上的新生兒血樣品中苯丙氨酸的含量。適用于新生兒苯丙酮尿癥（PKU）的篩查，僅用于體外檢測。
苯丙酮尿癥（簡稱PKU）是一種較常見的常染色體隱性遺傳性氨基酸代謝病，發(fā)病率約1/10,000。本病可因苯丙氨酸羥化酶缺乏引起，也可因輔酶因子BH4缺陷引起。這些缺陷致使苯丙氨酸不能被轉(zhuǎn)化為酪氨酸，導(dǎo)致大量的苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)堆積，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。其臨床主要表現(xiàn)為：發(fā)育遲緩，毛發(fā)、皮膚及虹膜變淺，癲癇，進(jìn)行性智力低下等。由于本病的早期發(fā)現(xiàn)早期治療，對患兒的生長發(fā)育、智力發(fā)育不受影響，因此被我國列為新生兒疾病篩查項目之一。檢測方法還有熒光法、酶法等。 【檢驗原理】
枯草桿菌在含有抑制劑的培養(yǎng)基中生長受到抑制，而當(dāng)外界提供苯丙氨酸環(huán)境時，抑制作用解除，枯草桿菌即可恢復(fù)生長且細(xì)菌生長環(huán)的直徑與苯丙氨酸的含量呈正比。所以在制備好的培養(yǎng)基上，放上濾紙干血片，血中的苯丙氨酸會擴散到周圍培養(yǎng)基中，被抑制的枯草桿菌即可恢復(fù)生長。用被檢樣品的菌環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品的菌環(huán)直徑相比，得出樣品中苯丙氨酸的含量。
【主要組成成分】
苯丙氨酸篩查試劑盒（細(xì)菌抑制法）組成表
名稱
96人份/盒
包裝
瓊脂糖粉 （瓊脂粉、葡萄糖粉） 1.5g/瓶
無色透明玻璃瓶
營養(yǎng)液（氨基酸、磷酸鹽緩沖液等）10ml/瓶
青霉素酶（青霉素酶、生理鹽水）0.3ml/瓶抑制劑（β-2-噻吩丙氨酸）1.0ml/瓶
菌株孢子懸液（枯草桿菌）0.2ml/瓶
一次性培養(yǎng)皿（透明聚苯乙烯）1塊
無色透明塑料袋
標(biāo)準(zhǔn)血片 2;4;8;20mg/dl(全血、苯丙氨酸)
1份
質(zhì)控血片C1、C2(全血、苯丙氨酸)1份
說明書1份
注*：標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品的濃度若有改變，將在試劑盒內(nèi)放通知單，同時通知。
【儲存條件及有效期】
儲存條件2℃～8℃,防止冷凍。
有效期６個月，試劑盒開啟后一次性使用。
【適用機型】
無需儀器檢測。
【樣本要求】
按照衛(wèi)生部規(guī)定的“新生兒采血常規(guī)"采取足跟血。
【檢驗方法】
1.瓊脂液配制：將瓊脂糖倒入三角燒瓶中，加入100ml雙蒸水（7日內(nèi)）加熱煮沸（建議沸騰三次）至*溶解，（燒瓶中放入一支溫度計監(jiān)控溫度）；
2.混合液配制：將青霉素酶、抑制劑、菌株孢子懸液加入到營養(yǎng)液瓶中，充分混勻備用； 3.當(dāng)瓊脂糖液的溫度降至55℃～60℃時，將混合液全部倒入瓊脂糖液中，充分混勻后（避免產(chǎn)生氣泡）快速倒入一次性培養(yǎng)皿中，使其成為厚薄均勻、平整光潔的薄層（厚度約３mm），待冷卻后備用；
4.用直徑3mm打孔器分別打取標(biāo)準(zhǔn)血片、質(zhì)控血片和待檢血片，按照加樣模板所示排列在培養(yǎng)皿上，將培養(yǎng)皿倒置放入37±℃0.5℃恒溫箱中培養(yǎng)16-18小時；
5.菌環(huán)量取：在菌環(huán)zui致密處分別量取標(biāo)準(zhǔn)血片、質(zhì)控血片和待檢血片細(xì)菌生長環(huán)的直徑，將待檢血片的細(xì)菌生長環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品相比較，可得出待檢血片的苯丙氨酸含量。 標(biāo)準(zhǔn)品菌環(huán)范圍：
2 mg/dl時菌環(huán)直徑為 0.75-1.05cm；4 mg/dl時菌環(huán)直徑為 1.25-.155cm； 8 mg/dl時菌環(huán)直徑為 1.55-1.85cm；20 mg/dl時菌環(huán)直徑為2.05-2.35cm； 質(zhì)控品菌環(huán)范圍：
陰性質(zhì)控菌環(huán)直徑應(yīng) ＜2mg/dl濃度點的直徑； 陽性質(zhì)控菌環(huán)直徑應(yīng) ＞4mg/dl濃度點的直徑。 【參考值（參考范圍）】 參考值< 4mg/dl
【檢驗結(jié)果的解釋】
1. 苯丙氨酸含量≥4mg/dl為可疑陽性，原血片復(fù)查，苯丙氨酸含量仍≥4mg/dl，即召回復(fù)查；
2. 檢測結(jié)果本身不能成為治療的惟一因素。必須與其他的臨床觀察和診斷試驗相結(jié)合； 3. 質(zhì)控品的結(jié)果必須控制在試劑盒要求范圍之內(nèi)，否則實驗結(jié)果可視為無效。
【檢驗方法的局限性】
1.應(yīng)使用新生兒篩查S&S 903#濾紙采集血斑。使用其他濾紙結(jié)果將不同； 2.采血時間為出生后72小時，并充分哺乳6次以上，否則會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度范圍：2-20 mg/dl.； 2. 批內(nèi)精密度：CV不大于10 %
3. 批間精密度：CV不大于12 %； 4. 準(zhǔn)確性：回收率為100～125％； 5. 靈敏度：小于1mg/dl.；
6. 特異性：與酪氨酸、色氨酸無交叉反應(yīng)。
【注意事項】
1. 本試劑盒為一次性使用產(chǎn)品；不同批號試劑不可混用；超出效期不可使用；僅用于體外檢測；
2.．所有試劑、樣本應(yīng)視為有潛在的傳染源，實驗結(jié)束應(yīng)采用高壓或消毒液浸泡處理。
【參考文獻(xiàn)】
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司技術(shù)部資料分析