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廣州健侖生物科技有限公司

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糞便總 DNA 提取試劑盒

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  • 所 在 地:
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  • 廣州健侖生物科技有限公司
  • 2019-04-11 14:44:25
  • 廣州市
  • 中國大陸
  • 1936

我要詢價

【簡單介紹】

品牌 其他品牌 規格 50
供貨周期 現貨 主要用途 (適用于從各種糞便中提取總 DNA)
糞便總 DNA 提取試劑盒:TM Fecal Total DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜技術,*去除糞便中的各種干擾物,提取高純度的 DNA。試劑盒采用了*的緩沖系統,可從多種不同類型的糞便樣中快速提取總 DNA (包括各種類型的細菌、真菌和脫落細胞)等。

【詳細說明】

糞便總 DNA 提取試劑盒

 Fecal Total DNA Extraction Kit

(適用于從各種糞便中提取總 DNA)

 

糞便總 DNA 提取試劑盒

試劑盒組成:50 (50 次)

儲存條件

本試劑盒在室溫(15-25 ℃)下可保存一年。 

產品特點:

TM Fecal Total DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜技術,*去除糞便中的各種干擾物,提取高純度的 DNA。試劑盒采用了*的緩沖系統,可從多種不同類型的糞便樣中快速提取總 DNA (包括各種類型的細菌、真菌和脫落細胞)等。

注意事項:

1.實驗前準備工作:詳細閱讀該手冊熟悉各步驟,并準備好所有的試劑盒組分、研缽、研棒、藥匙、1.5 ml 和 2 ml 滅菌離心管以及 37 ℃和 65 ℃ 的溫浴條件。

2.KSL1, KBL1 和 KW1 在低溫時可能產生混濁或沉淀,在 37-65 ℃溫浴片刻即可。

3.Buffer KW *次使用前請按瓶上標簽加入 50 ml 無水或 95%乙醇。每次使用后,請立即擰緊蓋子。

操作步驟:

(一)平衡吸附柱

1.取一 TM Mini Column 柱裝在一個 2 ml 收集管上(已備)。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子內,室溫 13 000 rpm 離心 1 min,使平衡液*流過柱子。棄收集管中的濾液,將空柱套回收集管內。

注意:柱子不平衡,將導致 DNA 產率減少。

(二) 樣品處理

2.可根據不同條件選擇以下方法:

A:研磨法:

1)液氮研磨: 取 10 - 30 mg 新鮮糞便樣品于研缽中,加入少量液氮, 迅速研磨,待樣品磨碎,再加少量液氮,再研磨,如此三次。將樣品迅速轉入 2 ml 離心管,加入 600-1000 μl Buffer KSL1,65℃水浴 15 min,其間混勻 2-3 次。然后 13,000 rpm,常溫離心,5 min.

2)小心將上清液轉至干凈的 2ml 離心管,加入 1.0-1.5 倍體積的異丙醇, 混勻, 13,000 rpm, 3 min, 離心棄去去上清; 保留沉淀。在沉淀中加入 100μl KE,*溶解,然后加入 1000-1500 μl KBL1,13,000 rpm, 2 min,上清液待轉移。

B.微波加熱法

1)取 10 - 30 mg 新鮮糞便樣品于 2 ml  離心管中,加入 600-1000 μl Buffer KSL1,強烈混勻,盡量不保留大的顆粒。65℃水浴 15 min,其間混勻 2-3 次。然后 13,000 rpm,常溫離心,5 min.  上清和沉淀都要備用。

2)上清液轉入新的 2 ml 離心管,待用。

3)將帶有沉淀的離心管放入普通微波爐,大功率下,加熱 1min;待結束后再加熱另一個 1 min;然后第三個 1 min.

4)加入 600-1000 μl Buffer KSL1 于加熱的離心管內,強烈混勻,65℃ 水浴 15 min,其間混勻 2-3 次。然后 13,000 rpm,常溫離心,5 min. 上清備用。

5)上清轉移至另一新的 2 ml 離心管。

6)在2) 和5) 的上清液中分別加入1.0-1.5 倍體積的異丙醇,混勻1 min, 常溫離心 13,000 rpm, 3 min, 去上清; 保留沉淀。在沉淀中分別加入 100 μl KE 溶解。合并兩個離心管的溶液。

7)加入 1000-1500 μl KBL1,混勻。一般不會出現沉淀,如有,離心棄去沉淀。

(三)吸附

3.將上清液轉移到平衡過的吸附柱內,室溫 13 000 rpm 離心 30 s,使裂解液*流過柱子。棄去收集管中的過濾液,將吸附柱套回收集管中。注意:1)室溫太低可能造成 KBL1 混濁或沉淀,在 37 ℃溫浴片刻即可。

2)如上清液體積過大,可以分成數次上柱,每次上樣量不要超過 700

μl。

4.(可選)加入 30 μl  濃度為 20-50 μg/ml 的RNase A  于柱的膜上,37 ℃

放置 5-10 min。

注意:本試劑盒沒有配備 RNase A 溶液。一般來說,這一步沒有必要,因為本試劑盒的純化柱對 RNA 沒有吸附能力。如果實驗要求不能殘留微量RNA,可采用這一步處理。

(四) 漂洗

5. 加入 700 μl Buffer KW1,室溫 13 000 rpm 離心 30 s,棄去收集管中的過濾液,保留柱。

7.加入 700 μl Buffer KW,室溫 13 000 rpm 離心 30 s,棄去收集管中的過濾液,保留柱。注意:Buffer KW 在*使用之前必須加入 50 ml 無水或95%乙醇,并置于室溫下保存。

8.(可選)重復用 700 μl 70%乙醇(室溫)洗滌柱子,室溫 13 000 rpm

離心 1 min。(注意:用 70%乙醇漂洗有利于提高 DNA 純度)

9.棄去收集管中的濾液,將空柱套回收集管內。室溫下,13 000 rpm 離心 2 min 以甩干柱子基質殘余的液體。

注意:此步驟不可省,否則將導致乙醇殘留于 DNA 中,影響后續反應。(五)洗脫

10.把柱子裝在一個新的 1.5 ml 離心管上,加入 50 μl 的 KE(可用滅菌的 TE 10 mM Tris-HCl,pH 8.0 或純水代替,純水可預先用 NaOH 調 pH 值至 8.0),65 ℃放置 5-10 min,13 000 rpm 離心 1 min 以洗脫 DNA。(也可以將 KE 預熱至 65℃,再加至膜上,可以減少放置時間至 1min)

注意:小心加 KE 到柱中吸附膜的中間部位,并確保液體將膜全部覆蓋。

11.DNA 應保存于 4 ℃,若長時間保存,可凍存于-20 ℃。

本司部分DNA提取試劑盒,致電:020-8257 4011楊永漢

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一、出入境快速診斷試劑:登革熱、諾瓦克、志賀氏、O157、霍亂、瘧疾、流感A+B、結核、炭疽、腺病毒、輪狀病毒、軍團菌抗體、流行性出血熱等試劑盒等。
二、ELISA診斷試劑:人狂犬病毒、嗜肺軍團菌、呼吸道合胞病毒、埃可病毒、柯薩奇病毒、Q熱柯克斯體、腺病毒、百日咳、肺炎支原體、布魯氏桿菌、鉤端螺旋體、麻疹病毒、腮腺炎、帶狀皰疹病毒、煙曲霉、白色念珠菌、單純皰疹病毒、風疹病毒、細小病毒等試劑盒等。
三、熒光PCR試劑:SARS病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒、甲型流感H1N1病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒、禽流感病毒H5N1核酸熒光PCR檢測試劑盒、登革熱病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒、乙型腦膜炎病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒、瘧原蟲核酸熒光PCR檢測試劑盒、西尼羅病毒毒核酸熒光PCR檢測試劑盒、鉤端螺旋體核酸熒光PCR檢測試劑盒、諾瓦克病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒、霍亂弧菌O1群核酸熒光PCR檢測試劑盒、霍亂弧菌O139群核酸熒光PCR檢測試劑盒等試劑盒等。
四、診斷血清:沙門氏菌屬診斷血清、志賀氏菌屬診斷血清、大腸艾希氏菌診斷血清、霍亂弧菌診斷血清等。

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