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WB跟ELISA實驗應該如何做選擇
閱讀:1709 發布時間:2015-11-19常有醫院科研者收集臨床血清樣本檢測某種細胞因子的表達情況,在選擇實驗方法時難以取舍。WB和ELISA不知道該選擇哪種方法,哪種方法的實驗結果更為可靠?有些人說ELISA自己包被抗體的話會比較麻煩,WB相比更加科學,發表文獻時容易被接納。但是血清中沒有內參可以選擇。是不是ELISA實驗操作要簡單很多,那么又如何來解決這樣的一個問題呢?上海恒遠生物科技有限公司資深技術給您解答這個疑惑。
一、WB和ELISA的敏感性有所區別。雖然前者用ECL顯色敏感度可達pg級,但不同的樣品來源和抗體的質量,不能保證每次都到這個級別;而ELISA可以達到ng級。也就是說ELISA更適于豐度低的蛋白檢測。而且由于ELISA檢測所用的樣品少,也適用于樣品來源有限的蛋白濃度檢測。
二、在定量方面,ELISA一般用于定性,定量也可, WB可以做到半定量。
三、ELISA不如WB的特異性好。
四、關于血清內因子的檢測,如果WB檢得出就不要用ELISA。血清內參的問題,在ELISA里也一樣存在。操作來說ELISA當然簡單,但由于兩種方法各有優點,不能全面相互代替。