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動物檢驗(yàn)檢疫中定量的核酸檢測技術(shù)
閱讀：1228 發(fā)布時間：2014-3-11在動物檢驗(yàn)檢疫中核酸檢測技術(shù)大多數(shù)無需要求定量，所以在這只作簡單介紹。核酸檢測的定量化在人醫(yī)臨床和動物疫病基礎(chǔ)研究中應(yīng)用較多，可用于病情評估、療效預(yù)測和觀察及預(yù)后判斷、疫病的病理分析，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。核酸的定量檢測一般有以下兩種方法。
(1)定量的核酸雜交技術(shù) 此類技術(shù)以分支鏈DNA信號放大技術(shù)(branched DNA signal amplification assay，bDNA)為典型代表，bDNA技術(shù)系美國Chiron公司的，屬于一種改良的核酸雜交技術(shù)，它定量的基本原理是樣品中被檢的特異性核酸越多，結(jié)合的探針也就越多，導(dǎo)致信號越強(qiáng)。此技術(shù)zui關(guān)鍵的部分是信號很強(qiáng)的探針，因此和其他核酸雜交技術(shù)相比，bDNA技術(shù)的靈敏度很高。國內(nèi)已有一些醫(yī)院采用bDNA技術(shù)進(jìn)行HBV基因和HCV基因的定量檢測。
(2)定量的PCR技術(shù) 此類技術(shù)有終點(diǎn)稀釋法、熒光PCR、競爭PCR、PCR-ELISA等模式。現(xiàn)在zui常用的是前面所述的熒光PCR技術(shù)。它定量的基本原理是樣品中被檢的特異性核酸越多，熒光信號突破臨界值所需的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)(即Ct值)越小。