化工儀器網
技術文章
恒遠教您如何減少實驗誤差小妙招
閱讀：942 發(fā)布時間：2021-1-22ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。該法適于測定細胞培養(yǎng)上清、血清、血漿及組織液中的樣本，干擾小可以測到每毫升納克水平的細胞因子（或受體）的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體。
②酶標記的抗原或抗體。
③酶作用的底物。
根據ELISA試劑盒的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。
（一）雙抗體夾心法。
（二）雙位點一步法。
（三）間接法測抗體。
（四）競爭法。
（五）捕獲法測IgM抗體。
（六）應用親和素和生物素。
ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗. 在這種方法中, 通常標準配體是固定的, 通過加入溶液相受體或蛋白質來使之成鍵. 通過加入與受體特異性反應的抗體來定量成鍵的受體, 而且初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測量. 第二種抗體能識別抗體的末端, 在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發(fā)生反應, 從而使溶液顯色。
操作注意事項
1.ELISA試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
4.所有液體組分使用前充分搖勻。