細胞核轉染系統，Amaxa

Nucleofector™ Technology，Amaxa核轉染系統，一直被模仿，*

簡介：Nucleofector核轉染技術

隨著系統生物學與交叉學科方法的應用，要求細胞和系統 模型越來越接近體內細胞的功能。這就意味著將來的細胞 轉染多數會是原代細胞的轉染。而傳統的方法很難成功轉 染原代細胞。另外即使使用細胞系做為系統模型，傳統的 方法也難重復出好的轉染效率與成活率。Nucleofector 技術就從根本上解決這個問題。無論是原代細胞、干細胞 還是細胞系，它每次都可重復出很高的轉染效率。 1998年，Nucleofector技術開發成功，2001年上市，是市場 上第*個有效的、非病毒介導的、用于原代細胞與難轉染細 胞系的轉染方法。現在Lonza還在繼續不斷改革創新，為研 究者推出更多更好的新產品。

原理：

NucleofectionTM技術是利用電擊在細胞膜上穿個小孔。并且 綜合優化了各種特定細胞轉染程序與轉染液，使得轉染物質 （如DNA、RNA等）不僅可以進入細胞質，而且可直接通過核 膜進入細胞核。這使得細胞的轉染效率*高可達99%。

Nucleofector技術的組成：

Nucleofector技術由Nucleofector儀器、細胞轉染試劑和操作 手冊組成

※ Nucleofector儀器：

1. 模塊化設計，各模塊可單獨配置；

2. 核心模塊內置各種細胞優化的電極參數，可直接選擇；

3. X模塊提供中低通量(1-16樣)，中低細胞數量(約1e+5 到1e+7)轉染；

4. Y模塊提供24孔板直接貼壁轉染；

5. 96模塊提供高通量(96樣)，低細胞數量(約1e+5)轉染；

6. LV模塊提供低通量，大量細胞直接轉染 (1e+8到1e+9)；

※ 試劑盒：包含有轉染溶液、添加劑、專*電極杯、吸管、 陽性對照質粒。轉染試劑為細胞轉染提供保護，即保證了 高的轉染效率與成活率，又幫助細胞維持良好的生理功能 性狀。我們提供有一系列的優化轉染試劑盒與操作手冊。

※ 數據庫與操作手冊：我們的在線數據庫提供600種以上細胞 的轉染數據和操作手冊。優化的操作手冊除了操作手冊除了 操作指導外，還包括細胞來源、傳代、生長條件、培養基以 及轉染后培養等細節技巧。

*具兼容性的模塊：Nucleofector X模塊

針對不同數量級的細胞，提供不同的電極杯。

X模塊可以使用兩種不同形式的聚合材料電極，分別是如下 電極杯和電極板條

100ul電極杯

※ 新式可導電材料的電極杯替代了原來鋁制電極杯

※ 低通量但是一次可轉較大量的細胞 (適用于生化應用或Western Blot實驗)

16孔20ul電極板條

※ 與96孔電極杯的板條一致

※ 中通量，低細胞數量（報告基因分析，RNAi）

可在相同的條件下轉不同數量的細胞

X模塊使用的相同材質制成的20ul電極板條與100ul電極杯，X模塊中不同的電極模式可選用相同的電轉程序(系 統可自動轉化應用于不同模塊的參數，客戶無需進行額 外操作)，實現實驗的方便性與靈活性*化。 一旦其中一種電極形式優化好，另一種就很容易轉化好。 不同通量的電轉條件也很容易轉化。 96孔模塊的操作手冊也適用于X模塊。

貼壁轉染模塊 4D-Nucleofector Y Unit

至今為止基于電轉的方法都是要求細胞處于懸浮狀態 Nucleofector進入一個新時代，細胞可以在貼壁狀態 下直接轉染。細胞培養在24孔板中，插入電極板即可 完成轉染。

優點：

※ 細胞生長在24孔板中，直接轉染

※ 可在細胞生長的任何時期進行轉染

※ 細胞活力好，轉染效率*可達70%

※ 與Clonetics原代動物神經元兼容

耗材：

根據簡化試劑盒的原則，我們提供兩種轉染試劑AD1與AD2， 適用于所有細胞類型。試劑盒可按下圖的指示進行選擇：

大量細胞轉染：LV模塊

使用4D-Nucleofector核轉系統，用于小量細胞轉染的實驗條件，可直接放大， 用于大量細胞的轉染。 

LV模塊采用封閉系統，可轉染1×107至1×109細胞。轉染的條件可使用X模塊， 以小體積進行摸索。之后再使用LV模塊，不需要重新優化，即可進行大量細胞 轉染。LONZA公司已進行過驗證的細胞有人T細胞、CHO-S、HEK293-S和K562等。 

優勢： 

※ 系統封閉 

※ 在無菌環境下轉染多達109細胞； 

※ 系統可放大 

※ 可用小體積優化并確定轉染條件； 

※ 詳細的操作步驟 

※ 在線數據庫中收錄了700多種細胞的實驗條件； 

※ 操作簡單 

※ 簡單的培訓即可掌握實驗技術； 

※ 軟件系統 

※ 操作軟件符合21CFR part11的規定；

兩種規格可選：

從小體積少量細胞直接放大到大體積大量細胞

應用：

※ 對人原代細胞進行體外基因修飾以用于細胞治療（例如，基因編輯、生產CAR-T細胞）；

※ 瞬時轉染后生產治療性蛋白或抗體，進行各種質粒的篩選；

※ 瞬時轉染大量細胞后用于細胞學實驗；

96孔模塊

96孔模塊可對原代細胞和各種細胞系提供1-96通量 的實驗條件。可設置96個不同的實驗條件，以得到*的實驗結果。完整的系統包含3個部分：

※ 4D核轉儀(Core+X模塊)來發送核轉程序

※ 96-well Shuttle Device來進行96孔的核轉

※ 安裝96-well Shuttle Device軟件的電腦， 用來控制儀器

耗材：

※ 用于原代細胞和各種細胞系的專*試劑盒

※ 對于未知條件的細胞提供優化試劑盒

優點：

※ 96個轉染孔可單獨設置轉染程序，完成全部核轉 只需不到5分鐘

※ 一次核轉，實驗96個不同條件，完成條件優化 訂購熱線：4**-686-*1**

基本款：Nucleofector 2b Device

2001年推出，用于實驗室研究的單管系統，低通量 有效轉染質粒、RNA等不同底物到原代細胞和難轉 染細胞系中。擁有4000篇以上的引用文獻。

耗材：

※ 提供50多種原代細胞，血液細胞及干細胞試劑盒

※ 5種細胞系試劑盒涵蓋了所有種類細胞系

※ cGMP試劑盒適用于蛋白生產應用

訂貨信息:

細胞核轉染系統，Amaxa