色譜柱是液相系統分離的“心臟”，是實現混合物分離的關鍵部件。心臟是一個堅韌而嬌嫩的器官，它的持續跳動確保身體各系統正常運轉，而它的任何病癥都會影響人體的狀態甚至生命。同樣地，色譜柱的狀態也直接決定了液相色譜分離效果和數據結果的準確性。因此，保持色譜柱的健康穩定至關重要。
色譜柱的耐受性與使用壽命主要取決于三個關鍵因素，其中90%的色譜柱損壞是由后兩個因素引起的：
先天身體素質——色譜柱填料本質上的化學穩定性
生活環境——樣品與流動相對色譜柱的污染
作息養生習慣——色譜柱使用維護規范
那么，本文就圍繞液相色譜的樣品與流動相的前處理和色譜柱的日常維護保養規范展開，幫助大家延長色譜柱使用壽命和提高分析的準確性、可靠性。
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質或者微生物都會堵塞色譜柱入口端的篩板。當篩板被堵住后，會引起污染物富集，液流不均，不僅會引起柱壓的升高也會導致色譜峰型拖尾、變寬，從而使柱效下降。
溶解的樣品進樣前建議用合適的針式過濾器過濾，以除去不溶物。
配置流動相的溶劑需使用色譜級別(HPLC級)的，水需要用娃哈哈或者屈臣氏的純凈水。流動相使用前用微孔薄膜過濾。同時還需要超聲波除去流動相中因溶解或因混合而產生的氣泡（氣泡會導致流量不準，基線波動）。
即便是樣品和流動相經微孔濾膜過濾后也仍然不能完全消除固體顆粒物質，因為輸液泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產生一些微小固體顆粒物質，這些固體顆粒物質被流動相帶入色譜柱，導致堵塞篩板。所以建議在色譜柱前端加裝保護柱，可以有效保護色譜柱前端的篩板不被堵塞和柱前端的填料不被污染。
色譜柱使用中最重要的一點就是一定要看使用說明書。因為色譜柱的使用說明書中包含了色譜柱日常維護保養的關鍵內容。
因為色譜柱屬于易耗品，全新的液相色譜柱在使用前，建議按照色譜柱出廠報告中的條件進行色譜柱的性能測試，并將結果保存起來，有利于日后監測色譜柱的損耗情況。更能保證檢測結果的準確和穩定。
液相色譜柱通常都是有流向要求的，色譜柱出廠時都會標明色譜柱的使用方向（Flow）。
避免任何的壓力突然變化；
柱溫不超過色譜柱的溫度使用范圍。
由于目前所用的色譜柱大多是以硅膠為基質的，流動相的pH值過小時，會導致鍵合相的斷裂；當pH值過大時，固定相顆粒硅膠易溶解。所以色譜柱的pH使用范圍非常關鍵，一旦發生超出pH使用范圍的情況發生，色譜柱入口處就會塌陷，導致色譜峰異常。
色譜柱的保存建議使用色譜柱說明書的儲存溶液進行保存，柱子不能保存在純水或含鹽水溶液中，否則會引起微生物的滋生。
反相色譜柱使用及貯存：
新色譜柱的活化：首次使用時，用純有機相沖洗30倍柱體積，將泵流速設置為0.1mL/min（或最低設置）并在30分鐘內增大至正常流速。
過渡流動相：有機相和水相的組成與分析流動相比例相同，但是不含緩沖鹽的溶液，過渡20倍柱體積。
樣品分析：流動相平衡20倍柱體積，基線平穩后，開始進樣。
分析完成后沖洗：再用過渡流動相以1.0mL/min 沖洗色譜柱30倍柱體積，然后保存溶劑沖洗30倍柱體積保存。
短期保存 ：不超過四天，按日常維護沖洗至系統基線平穩，保存在純有機溶劑中，然后確認色譜柱堵頭已塞緊。
長期保存 ：超過四天，請將色譜柱貯存在出廠保存溶劑中，并確認色譜柱堵頭已塞緊。
超過兩個月不使用 ：請每兩個月用出廠保存溶劑沖洗一次，避免干涸。
注意事項：
*切勿使用緩沖液或離子對試劑貯存色譜柱；
*避免純水沖洗色譜柱，用純水短時間內沖洗色譜柱，通常不會對色譜柱立刻造成較大的損傷，但如果長時間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相流失、固定相塌陷現象和柱效下降。
正相色譜柱使用及貯存：
色譜柱的再生是指通過一些手段將色譜柱的部分性能恢復。色譜柱是易耗品，通常都是有使用壽命的。隨著時間和進樣次數的增加，一些保留性較強的物質會積累在柱頭，流動相溶液成分不足以把這些物質洗脫，以致于會出現色譜峰降低，峰寬變大或者“鬼峰”，柱效下降的情況。為了有效地延長色譜柱的使用壽命，建議進行必要的再生清洗。下面是實驗室常用的色譜柱再生方法，供大家參考。
反相固定相的再生
使用下列每種溶劑20-30倍柱體積，流速為典型流速的1/5到1/2進行沖洗：100%甲醇—100%乙腈—100%異丙醇—100%二氯甲烷或100%正己烷—100%異丙醇—100%甲醇。
正相固定相的再生
使用下列每種溶劑20-30倍柱體積，流速為典型流速的1/5到1/2進行沖洗：100%正己烷→100%氯仿→100%乙酸乙酯→100%丙酮→100%乙醇→100%異丙醇。
5
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務