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PCR試劑 SYBR Green I核酸染料(PCR級,10000X)
貨號:SR4110
規格:50/100ul
保存:-20℃避光保存,有效期少一年。
產品說明 :
SYBR Green I 染料是一種直接與雙鏈 DNA (dsDNA) 結合的熒光染料,是熒光定量 PCR 常用的 DNA結合染料。在定量 PCR 中,SYBR Green I 可與雙鏈 DNA(dsDNA)非特異性結合后發出熒光,則可以通過檢測反應體系中的 SYBR Green I 熒光強度,達到檢測 PCR 產物擴增量的目的。游離狀態下,SYBR Green I 發出微弱的熒光,一旦與 dsDNA 結合,其熒光增加 1000 倍,一個反應發出的全部熒光信號與出現的 dsDNA 量成比例,且會隨擴增產物的增加而增加;所以通過檢測 PCR 反應液中的熒光信號強度,可以對目的基因進行準確定量,同時還可以測定擴增的目的 DNA 片段的熔解溫度。
使用說明 :
使用時,配置PCR反應混合液, 將10000×SYBR Green I濃縮液加入到PCR反應體系, 使終濃度為0.5× (0.2×到 1×之間調整) 。以上操作建議在冰上進行。
注: ① 反應液配制方法和 PCR 擴增條件請參照 DNA 聚合酶使用說明。
② Realtime PCR 擴增儀的使用方法,請參照各儀器說明書。
注意事項 :
使用濃度對熒光 PCR 結果的影響
SYBR Green I 的使用濃度是保證熒光定量 PCR 實驗成功非常關鍵的因素。如果 SYBR Green I 的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出;而在高濃度時,將會抑制 PCR 反應,降低PCR 反應效率。所以一般在使用 SYBR Green I 時應根據實際情況優化使用濃度,反應的終濃度為 0.2×到 1×之間。
鎂離子濃度的影響
提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應的抑制作用。 我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應時,鎂離子濃度比無 SYBR Green I 的普通 PCR 反應高出 0.5~3mM。
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PCR試劑 SYBR Green I核酸染料(PCR級,10000X)訂購說明:
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PCR試劑 SYBR Green I核酸染料(PCR級,10000X)運輸說明:
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