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TriQuick 總 總 RNA 提取試劑 （TriQuick Reagent ）
貨號 ： R1100
規格 ： 100ml
保存 ： 4℃避光保存，保質期 12 個月。
產品簡介 ：
本試劑是一種通用的總 RNA 提取試劑， 適用于動植物細胞或組織及細菌的總 RNA 抽提， 可有效防止 RNA
在提取過程中的降解。 獲得的 RNA 可直接用于 Northern 雜交， 純化 mRNA， 體外翻譯， RNase 保護實驗， RT-PCR
以及 cDNA 克隆等一系列操作。該試劑可用于 100 次總 RNA 提取（10 平方厘米細胞或 100mg 組織）。
操洽說明: 自備新開封或氯仿，異丙醇，75%乙醇，DEPC 處理水。
1. 細胞裂解或組織勻漿 ：
1)貼壁細胞：吸盡培養液，每 10 平方厘米（6 孔板孔或 35 mm 平皿）細胞加入 1 ml TriQuick Reagent,使其覆蓋
培養細胞，再用吸管或加樣器吹打 2~3 次，細胞應*裂解，然后轉移離心管中。
2)懸浮細胞： 離心收集細胞， 吸盡液體， 每五百萬一千萬 （5×10 6 -1×10 7 ） 動植物或酵母細胞， 或一千萬 (1×10 7 )
細菌，加入 1ml TriQuick Reagent 。用吸管或加樣器吹打，使其*裂解。某些酵母和細菌如裂解不充分，可
用勻漿器勻漿，以確保其*裂解。轉移離心管中。
3)組織：先將組織剪切成小塊，放入玻璃勻漿器內。冷凍組織可在研缽中研磨勻漿。每 50-100mg 組織加入 1ml
TriQuick Reagent ，勻漿*裂解。轉移離心管中。
裂解產物應呈澄清的透明粘稠液體。室溫放置 5 分鐘。對于多糖、蛋白等雜質豐富的組織樣品，勻漿后仍
會存留有不溶物質，可 12000g 4℃離心 10 分鐘，然后吸取上清一新的離心管中。
2. 分離 ：在裝有裂解物的離心管中加入 0.2 倍體積的氯仿（1 ml TriQuick Reagent 加入 0.2 ml 氯仿），振蕩器
上充分振蕩混勻 30 秒，室溫放置 2-3 分鐘。12000g 4℃離心 10 分鐘，然后吸取含總 RNA 的上層水相一新的
離心管中，每毫升 TriQuick Reagent 約可吸取 0.5-0.6 ml。有機相和中間層含有 DNA 和蛋白質，應避免觸及。
3. 沉淀 ：按每毫升 TriQuick Reagent 加入 0.5 ml 異丙醇，顛倒數次混勻，室溫沉淀 10 分鐘。12000g 4℃離心
10 分鐘，在管底可見 RNA 沉淀。棄上清，按每毫升 TriQuick Reagent 加入 1 ml 75%乙醇，輕輕顛倒混勻，以
清洗 RNA 沉淀。12000g 4℃離心 2 分鐘，棄去液體，小心勿丟棄 RNA 沉淀。室溫倒置晾干 5~10 分鐘。
4. 溶解 ：加入適量 DEPC 處理水使 RNA 沉淀溶解。存放于-80℃。
注意事項 ：
1，RNA 提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無 RNA 酶。操作中應小心，防止外源性 RNA 酶
污染樣品導致 RNA 樣品降解。
2，試劑中含有酚等有害物質，注意個人防護。
相關產品 ：
R1600 DEPC 處理水
P1011 酚：氯仿：異戊醇＝ 25 ： 24 ： 1 （ PH<5.0 ）
R1050 5×RNA Loading Buffer
M1010 10×MOPS 緩沖液
SR0020 RNAwait( 非凍型組織 RNA 保存液 ）
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