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中性、堿性土壤速效磷含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2965
規格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加入5 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存一周；

2. 試劑二：臨用前加入5 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存一周；

3. 標準品：10 μmol/mL標準磷儲備液；

4. 工作液（定磷劑）的配制：按H₂O：試劑一：試劑二：試劑三=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液應為淺黃色。若變色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，工作液應現配現用。

注意：配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
產品說明：
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態磷、一部分微溶性的無機磷和易礦化的有機磷等，土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。
用弱堿法提取堿溶性磷和吸附態磷，鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質，通過測定660nm光吸收，即可計算磷含量。
技術指標：
低檢出限：0.018 μmol/mL
線性范圍：0.03125-3 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
實驗中所需儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、30-50目篩、漩渦震蕩儀、研缽、EP管、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

新鮮土樣風干，過30-50目篩，按照土壤質量（g）：提取液體積(mL)為1：10-20的比例（建議稱取約0.05g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清液待測。
二、測定步驟

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節波長至660nm，蒸餾水調零。

2. 將10μmol/mL標準液用提取液稀釋為3、2、1、0.5、0.25、0.125μmol/mL的標準溶液備用。

3. 標準溶液稀釋表：

4. 樣本測定：(在1.5mL離心管中或96孔板依次加入下列試劑)

注意事項：
1、工作液（定磷劑）應現配現用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍則均為失效。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管或EP管等試驗器材均要求嚴格無磷。
3、顯色結束后應立即檢測。
4、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
5、用96孔板檢測時，注意板孔中的液體有無氣泡，如有氣泡應排除氣泡后再測定OD值。
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