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土壤總磷/有機磷/無機磷含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2895
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三：臨用前加入4 mL蒸餾水溶解，2-8℃可以保存4周；

2. 試劑四：臨用前加入4 mL蒸餾水溶解，2-8℃可以保存4周；

3. 定磷試劑的配制：臨用前按試劑二：試劑三：試劑四=1:1:1的體積比配制。配好的定磷試劑應為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，限當天使用。配制過程中，可能會產生黑色固體，其不影響結果，注意吸取時不要將黑色固體吸入。（注意：配制時最好使用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿，以避免磷污染。）

4. 標準品：10 μmol/mL磷標準液。

產品說明：
土壤總磷包括有機磷和無機磷，其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經過礦化分解而轉化為無機磷。同時測定土壤總磷、有機磷和無機磷，可以全面反映土壤磷營養狀況。
利用鉬藍法定磷。取一份土樣，通過浸提法測定土壤無機磷含量；另外取一份土樣，經高溫灼燒后，土壤有機磷轉化為無機磷，測得土壤總磷含量；總磷含量減去無機磷含量，即可計算出有機磷含量。
技術指標：
低檢出限：0.015 µmol/mL
線性范圍：0.0323-6.0 µmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、可調式水浴鍋、分析天平、可調式移液器、550℃高溫電爐、研缽、蒸餾水、30-50目篩、100目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

一、樣本處理：（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
1.無機磷：稱取通過30-50目篩子的風干土樣0.01g，轉移到1mL離心管，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，離心10min，取上清液一，用于無機磷含量測定。
2.總磷提取：取通過100目篩子的風干土樣，550℃灼燒1h，冷卻后稱取約0.01g，轉移到1 mL離心管，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，離心10min，取上清液二，用于總磷含量測定。
二、測定步驟

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節波長到660nm，蒸餾水調零。

2. 1μmol/mL 標準溶液的配制：取100μL 10 1μmol/mL磷標準液，加入900μL蒸餾水，充分混勻，配制成1μmol/mL標準液使用，現用現配。

3. 打開水浴鍋，調節溫度到40℃。

4. 空白管：取EP管，依次加入100μL 蒸餾水，100μL 定磷試劑，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A空白管。空白管只需做1-2次。

5. 標準管：取EP管，依次加入10μL 標準液，90μL 蒸餾水，100μL 定磷試劑，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A標準管。標準管只需做1-2次。

6. 測定管：取EP管，依次加入10μL 上清液一或者上清液二，90μL 蒸餾水，100μL 定磷試劑，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A測定管。

注意事項：

1. 如果吸光值大于1時，樣本需用蒸餾水做相應稀釋。

2. 空白管和標準管只需測定1-2次。

3. 需在40min內完成比色。

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