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化學(xué)發(fā)光技術(shù)
閱讀：888 發(fā)布時(shí)間：2011-6-15放射免疫分析法有很高的靈敏度，但存在著放射性防護(hù)和同位素污染等問題。近年來，許多非放射性同位素標(biāo)記的免疫分析方法相繼出現(xiàn)。其中，在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)及抗原-抗體特異性識(shí)別基礎(chǔ)上建立起來的一種新的非放射免疫分析技術(shù)--化學(xué)發(fā)光免疫分析法，由于這種方法具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，精密度好，線性范圍寬，儀器設(shè)備簡(jiǎn)單，試劑價(jià)格低廉，方法穩(wěn)定、快速等優(yōu)點(diǎn)，已成為一種重要的非同位素標(biāo)記免疫學(xué)檢測(cè)方法。
把化學(xué)發(fā)光物質(zhì)與免疫學(xué)反應(yīng)結(jié)合起來，用光反應(yīng)表現(xiàn)被測(cè)的免疫成分濃度，即把高靈敏的光反應(yīng)與特異性的免疫學(xué)反應(yīng)相結(jié)合的方法，稱為化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)。
化學(xué)發(fā)光技術(shù)是將發(fā)光物質(zhì)（如吖啶酯、魯米諾等）標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng)，發(fā)光物質(zhì)在反應(yīng)劑（如過氧化陰離子）激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體，當(dāng)激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時(shí)發(fā)射出光子，用自動(dòng)發(fā)光分析儀接收光信號(hào)，測(cè)定光子產(chǎn)量，以反映待檢樣品中抗體或抗原含量。化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的檢測(cè)靈敏度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于ELISA、熒光免疫等，而優(yōu)于或與同位素檢測(cè)相當(dāng)；在使用方便性上，化學(xué)發(fā)光與傳統(tǒng)ELISA方法一樣簡(jiǎn)單易用；在對(duì)人體和環(huán)境的危害上，化學(xué)發(fā)光對(duì)此沒有任何擔(dān)憂。
目前，越來越多的免疫檢測(cè)項(xiàng)目通過化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)來進(jìn)行，以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的ELISA和放射免疫分析法。
化學(xué)發(fā)光免疫分析包括三大類型：標(biāo)記化學(xué)發(fā)光物質(zhì)的化學(xué)發(fā)光免疫分析、標(biāo)記熒光物質(zhì)的熒光化學(xué)發(fā)光免疫分析和標(biāo)記酶的化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析。
zui近的一些分子生物學(xué)進(jìn)展使得一些生物技術(shù)工具極大提高了生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)和快速應(yīng)用。生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光（BL／CL）的主要特點(diǎn)就在于發(fā)光信號(hào)的高度可測(cè)性，可以用PMT（光電倍增管）和CCD成像系統(tǒng)來檢測(cè)極少量的光子信號(hào)。BL是屬于CL范疇之內(nèi)，CL反應(yīng)的特點(diǎn)是高光子產(chǎn)生效率，BL為0．5～0．8，CL為0．1-0．001。因此BL／CL的檢測(cè)極限可以達(dá)到10-21～10-18mol，這顯然要比其他的光學(xué)技術(shù)強(qiáng)得多。BL／CL已經(jīng)廣泛的應(yīng)用到免疫檢測(cè)中進(jìn)行標(biāo)記物的超靈敏檢測(cè)。
CL免疫檢測(cè)不但可以通過以CL分子直接標(biāo)記抗原或抗體，也可以以CL底物標(biāo)記可被檢測(cè)的酶。相比同位素檢測(cè)，CL檢測(cè)以其更加靈敏和可檢測(cè)性獲得越來越多的應(yīng)用。