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蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法
閱讀：896 發布時間：2011-5-28蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法
點擊次數：2 發布時間：2011-4-26 9:08:39
1．直接鏡檢和活菌計數
（1）直接鏡檢 采取患者嘔吐物或剩余殘食等為檢樣。將其用無菌生理鹽水浸漬、稀釋后制涂片，干燥，革蘭染色、鏡檢。若有革蘭陽性大桿菌[（4～5）um×1um左右l菌兩端較平整，芽孢不大于菌體寬度，中生或稍偏端，運動，即為可疑菌。
（2）活菌計數 將殘余食物以無菌生理鹽水稀釋成1：10，1：100，1：1000，…，分別用lml的滅菌吸管各吸取稀釋液0．1ml作傾注培養，或接種于10％卵黃瓊脂平板上，用滅菌的L形棒涂勻于平板表面，置37℃溫箱培養12h后，取出計數。3-6h后該菌在卵黃瓊脂平板上產生乳白色渾濁環，可和不產生乳白色渾濁的枯草桿菌等雜菌區別。
2。分離培養
將嘔吐物直接劃線或先把剩余殘食等置滅菌乳缽中加適量無菌生理鹽水研磨后，劃線接種于普通平板或血平板，或10％卵黃瓊脂平板上，置37~C培養18-24h后觀察。如普通瓊脂上生長呈乳白色，不透明，邊緣不整齊常為擴散狀，直徑4～6mm的菌落，迎光觀察似白蠟狀，可疑為蠟樣桿菌。血平板上，菌落為灰色不透明似毛玻璃狀，其周圍呈草綠色溶血。
3。生化反應
該菌分解葡萄糖、麥芽糖、糊精、蔗糖；不分解乳糖、鼠李糖、木糖、伯膠糖、甘露醇、肌醇、山梨醇及側金盞花醇。吲哚陽性，甲基紅陰性，V．P陽性，檸檬酸鹽利用、卵磷脂酶、KCN均為陽性。在24L內液化明膠。H：S、脲酶陰性。酪蛋白酶、觸酶陽性，溶血還原硝酸鹽，溶血還原美藍、石蕊牛乳迅速蛋白胨化。
4．卵磷脂酶試驗
用鉑耳取疑似蠟樣芽孢桿菌的肉湯培養物點種于10％的卵黃瓊脂平板上，該菌在其上有強烈的磷脂酶作用，生長迅速，于37~C培養3h后雖未見菌落但可看到因卵磷脂酶分解卵磷脂而呈乳白色渾濁環，稱乳光反應。6h后此環可擴散至5-6mm。