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基因測(cè)序儀的工作原理
閱讀：1312 發(fā)布時(shí)間：2022-9-27
基因測(cè)序儀是一臺(tái)能自動(dòng)灌膠、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)數(shù)據(jù)收集分析等全自動(dòng)電腦控制的測(cè)定基因片段的儀器。可廣泛用于基因測(cè)定，癌細(xì)胞的表達(dá)普測(cè)定、親子鑒定、個(gè)體識(shí)別、基因檔案、父系鑒定、母系鑒定、種族鑒定、種屬鑒定、傳染病的測(cè)定及胎兒遺傳缺陷的分析，比如癌細(xì)胞有起固有的表達(dá)方式，通過測(cè)定可得知人體癌細(xì)胞的發(fā)生和變化情況。
DNA測(cè)序儀的工作原理主要基于Sanger的雙脫氧鏈末端終止法或Maxam-Gilbert的化學(xué)降解法。
這兩種方法在原理上雖然不同，但都是根據(jù)在某一固定的位點(diǎn)開始核苷酸鏈的延伸，隨機(jī)在某一個(gè)特定的堿基處終止，產(chǎn)生以A、T、C、G為末端的四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸鏈，在變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳進(jìn)行片段的分離和檢測(cè)，從而獲得DNA序列。由于雙脫氧鏈末端終止法更簡(jiǎn)便和更適合于光學(xué)自動(dòng)探測(cè)，因此在單純以測(cè)定DNA序列為目的的全自動(dòng)DNA測(cè)序儀中應(yīng)用廣泛。而化學(xué)降解法在研究DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)以及蛋白質(zhì)-DNA相互作用中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。這里主要介紹雙脫氧鏈末端終止法的測(cè)序原理 。