12
UHPLC反相色譜柱的使用和操作方式
UHPLC反相色譜柱是一種具有*碳載量的固定相。高碳鏈覆蓋度使其具有密集的鍵和優異的形狀選擇性，在PH低至1的環境中仍能保持良好的穩定性。它主要應用于傳統的C18柱無法分離的類胡蘿卜素的異構體和其他長烴基物質的分離。
UHPLC反相色譜柱的使用：
在使用前，進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照出廠報告中的條件進行，只有這樣，測得的結果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
UHPLC反相色譜柱的操作方式：
1、在條件允許情況下，在使用前對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
2、所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于60℃。
3、樣品
將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲醇），為達到較好峰形，需要降低進樣量（以250x4.6mm規格為例，小于10μL）。
4、流動相
所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當日實驗當日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類型。